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原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)實驗研究使用! 不能用于臨床或動物診斷！

細(xì)胞簡介：

小鼠臍靜脈平滑肌分離自臍帶組織；它是臍靜脈的重要結(jié)構(gòu)組成細(xì)胞之一，在機(jī)體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結(jié)構(gòu)，臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈，卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中，子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細(xì)血管，與胎盤的子體部胎兒毛細(xì)血管靠近，在此處母體和胎兒的血液間進(jìn)行CO2和O2，代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動脈將胎兒產(chǎn)生的廢物運送至胎盤，臍靜脈將O2和營養(yǎng)物質(zhì)從胎盤運送給胎兒。血管平滑肌是許多重大血管疾病的細(xì)胞基礎(chǔ)；血管平滑肌細(xì)胞的異常增加的生長潛力在血管疾病發(fā)生過程中起決定作用。由于臍帶是分娩過程中的廢棄物，同時從臍帶中分離人臍靜脈平滑肌細(xì)胞方法相對成熟，使得體外培養(yǎng)的臍靜脈平滑肌細(xì)胞作為研究血管的模型細(xì)胞。臍靜脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細(xì)胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠臍靜脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的小鼠臍靜脈平滑肌采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個細(xì)胞。

?細(xì)胞計數(shù)?：使用血細(xì)胞計數(shù)器或其他方法對細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠可溶性壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sAIL)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat macrophage colony stimulating factor (M-CSF) ELISA Kit 大鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒

HumanMethemoglobin,MHBELISAKit 人高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanadrenomedullin,ADMELISA試劑盒人腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物NADPH氧化酶活性比色法定量檢測試劑盒20次(10樣本)

MouseactivatedproteinC,APCELISAKit小鼠活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠肌肝（Cr）ELISA試劑盒         組裝/原裝

小鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠活化素A(Activin-A)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠硬脂酰去飽和酶(SCD)ELISA試劑盒 ，英文名： SCD ELISA Kit

Mouse ovalbumin specific IgE (OVA sIgE) ELISA Kit 小鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒

MouseNeuroophin3,-3ELISAkit 小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子3(-3)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanelecon-ansfer-flavoproteinbetapolypeptide,ETFBELISAKit人電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽規(guī)格：48T/96T

細(xì)胞3-羥-3-甲戊二酰(HMG-COA)還原酶比色法定量檢測試劑盒20次

ELISAKitAPC大鼠活化蛋白C規(guī)格：48T/96T

IL17RA重組大鼠 IL17RA / IL17R 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

GHR (growth hormone receptor 0.5mgGHR (growth hormone receptor) 生長激素受體(抗原)

CASK重組人 CASK Kinase 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

DDR1 Protein Human 重組人 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (aa 444-913, His & GST 標(biāo)簽)

FLT4 Protein Mouse 重組小鼠 VEGFR3 / FLT-4 蛋白 (His 標(biāo)簽)

小鼠臍靜脈平滑肌細(xì)胞GHR (growth hormone receptor 0.5mgGHR (growth hormone receptor) 生長激素受體(抗原)

DDR1 Protein Human 重組人 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (aa 444-913, His & GST 標(biāo)簽)

IL17RA重組大鼠 IL17RA / IL17R 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

FLT4 Protein Mouse 重組小鼠 VEGFR3 / FLT-4 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CASK重組人 CASK Kinase 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用