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原代細(xì)胞VS細(xì)胞系：

用酶或機(jī)械方法直接從人或動物組織中分離出來的細(xì)胞。嚴(yán)格來說，從機(jī)體分離出來到傳代之前的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞，絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。

?小鼠外周血單核細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞簡介：

小鼠外周血單核分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞，在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。單核細(xì)胞起源于骨髓中的造血干細(xì)胞，并在骨髓中發(fā)育。當(dāng)它們從骨髓進(jìn)入血液時仍然是尚未成熟的細(xì)胞。與其他血細(xì)胞比較，單核細(xì)胞內(nèi)含有更多的非特異性脂酶，并且具有更強(qiáng)的吞噬作用。單核細(xì)胞在血液中停留2-3天后遷移到周圍組織中，細(xì)胞體積繼續(xù)增大，直徑可達(dá)50-80μm，細(xì)胞內(nèi)所含的溶酶體顆粒和線粒體的數(shù)目也增多，成為成熟的細(xì)胞。固定在組織中的單核細(xì)胞稱為組織巨噬細(xì)胞，它們經(jīng)常大量存在于淋巴結(jié)、肺泡壁、骨髓、肝和脾等器官。激活了的單核細(xì)胞和組織巨噬細(xì)胞能生成并釋放多種細(xì)胞毒、干擾素和白細(xì)胞介素，參與機(jī)體防衛(wèi)機(jī)制，還產(chǎn)生一些能促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞生長的因子。在炎癥周圍單核細(xì)胞能進(jìn)行細(xì)胞分裂，并包圍異物。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠外周血單核經(jīng)CD14免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的小鼠外周血單核采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 巨噬細(xì)胞樣

傳代特性 不增殖；不傳代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞一般傳至10代左右，大部分細(xì)胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機(jī)"而繼續(xù)傳下去，存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代，叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會出現(xiàn)“危機(jī)"，這時有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)，從而可能無限制地傳代下去，稱為細(xì)胞系。

也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來的有限細(xì)胞系、無限細(xì)胞系，因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱為細(xì)胞株。

細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點(diǎn)，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human lysozyme (LZM) ELISA Kit 人(LZM)ELISA試劑盒

Humanmailysin,MATELISAKit 人基質(zhì)裂解蛋白(MAT)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanAi-adrenocoicalaibody,AAAELISA試劑盒人抗腎上腺皮質(zhì)抗體(AAA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物果膠甲酯酶(pectinmethylesterase;PME)活性比色法定量檢測試劑盒20次

HumanβLactoglobulin，β-LgELISAKit人β乳球蛋白(β-Lg)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠防御素A2   英文名稱：   Mouse Defensins A2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   DA2

小鼠內(nèi)毒素   英文名稱：   Mouse Endotoxin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   EDT

小鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白   英文名稱：   Mouse Eosinophil Cationic Protein   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   ECP

小鼠上腺素   英文名稱：   Mouse    規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   EPI

大鼠5核苷酸酶(5-)ELISA試劑盒 ，英文名： 5- ELISA Kit

Mouse maix metalloproteinase 9/ gelatinase B (MMP-9/Gelatinase B) ELISA Kit 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B)ELISA試劑盒

MousePepsinELISAKit 小鼠(Pepsin)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumaesistinELISAKIT人抵抗素規(guī)格：48T/96T

通用型豬丹毒(SeMr)試劑盒20次

ELISAKitUK大鼠規(guī)格：48T/96T

TLR2重組小鼠 TLR2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

蛋白激酶R(PKR)重組蛋白 Recombinant Protein Kinase R (PKR)

GLRX重組人 Glutaredoxin / GRX1 / GLRX 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

EDA2R Protein Human 重組人 XEDAR / EDA2R 蛋白 (His 標(biāo)簽)

IFNA13 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNA13 / Interferon alpha-13 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

小鼠外周血單核細(xì)胞蛋白激酶R(PKR)重組蛋白 Recombinant Protein Kinase R (PKR)

EDA2R Protein Human 重組人 XEDAR / EDA2R 蛋白 (His 標(biāo)簽)

TLR2重組小鼠 TLR2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

IFNA13 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNA13 / Interferon alpha-13 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

GLRX重組人 Glutaredoxin / GRX1 / GLRX 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點(diǎn)燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個細(xì)胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計數(shù)：用計數(shù)板計數(shù)，如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過大，再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細(xì)胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。