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上海研伴實(shí)業(yè)有限公司
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更新時間:2017-10-20 16:19:02瀏覽次數(shù):240次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線A-704人腎癌細(xì)胞
Human Kidney Cancer Cells
貨號:A704
價格:¥1350.0
規(guī)格: 1*10?6?
細(xì)胞介紹
A-704細(xì)胞系來源于78歲男性腎癌患者,D.J. Giard建系,該細(xì)胞適宜做轉(zhuǎn)染宿主。細(xì)胞在免疫缺陷小鼠上不能形成移植瘤,但是可以在半固體培養(yǎng)基中形成克隆。
A-704
人腎癌細(xì)胞
Human Kidney Cancer Cells
貨號:A704
價格:¥1350.0
規(guī)格: 1*10 6
細(xì)胞介紹
A-704細(xì)胞系來源于78歲男性腎癌患者,D.J. Giard建系,該細(xì)胞適宜做轉(zhuǎn)染宿主。細(xì)胞在免疫缺陷小鼠上不能形成移植瘤,但是可以在半固體培養(yǎng)基中形成克隆。
細(xì)胞特性
1)來源:腎癌
2)形態(tài):上皮細(xì)胞樣,貼壁生長
3)含量:>1x106 個/mL
4)污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
A-704人腎癌細(xì)胞運(yùn)輸和保存:使用T25瓶充液發(fā)送活細(xì)胞。收到細(xì)胞后,請先在顯微鏡下檢查細(xì)胞生長狀態(tài),并將T25瓶置于培養(yǎng)箱約6h或過夜后,再次檢查細(xì)胞狀態(tài)。若狀態(tài)良好,可進(jìn)行細(xì)胞后續(xù)處理操作,按照以下方式進(jìn)行。若發(fā)現(xiàn)可疑污染物,請及時與我們?nèi)〉谩?/span>
細(xì)胞用途:僅供科研使用。
A-704人腎癌細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM, GIBCO,貨號41500034,添加NaHCO3 1.5g/L,丙酮酸鈉 0.11g/L)。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
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商鋪:http://www.yixinui.com/st565221/
主營產(chǎn)品:elisa試劑盒,標(biāo)準(zhǔn)品,對照品,細(xì)胞株,科研抗體,生物試劑,化學(xué)試劑,實(shí)驗(yàn)外包,科研耗材
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