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更新時(shí)間:2017-10-23 10:00:55瀏覽次數(shù):183次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 環(huán)保在線人巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞
Human Megakaryocytic Leukemia Cells
貨號:DAMI
價(jià)格:¥1500.0
規(guī)格: 1*10?6?
細(xì)胞介紹
從一個(gè)巨核細(xì)胞白血病患者的血液建立了一株新的人類巨核細(xì)胞(Dami)。 此細(xì)胞懸浮生長為主,倍增時(shí)間24-30小時(shí)。至少89%的細(xì)胞可與血小板糖蛋白(GP) lb and Ilb/llla及血型糖蛋白單克隆抗體反應(yīng)。
人巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞
Human Megakaryocytic Leukemia Cells
貨號:DAMI
價(jià)格:¥1500.0
規(guī)格: 1*10 6
人巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞細(xì)胞介紹
從一個(gè)巨核細(xì)胞白血病患者的血液建立了一株新的人類巨核細(xì)胞(Dami)。 此細(xì)胞懸浮生長為主,倍增時(shí)間24-30小時(shí)。至少89%的細(xì)胞可與血小板糖蛋白(GP) lb and Ilb/llla及血型糖蛋白單克隆抗體反應(yīng)。不與抗淋巴腺、單核細(xì)胞、粒性白細(xì)胞、巨噬細(xì)胞抗原的抗體反應(yīng)。Dami細(xì)胞為研究巨核細(xì)胞生化及分化提供了*的模型。
細(xì)胞特性
1) 來源:巨核細(xì)胞白血病
2) 形態(tài):巨核細(xì)胞
3) 含量:>1x106 個(gè)/mL
4) 污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
運(yùn)輸和保存:使用含有優(yōu)質(zhì)胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細(xì)胞。收到細(xì)胞后,可在1000RPM,常溫條件下,離心5min后,于潔凈操作臺(tái)棄去上清,加入*使用的培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)移至10cm培養(yǎng)皿或者T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。
細(xì)胞用途:僅供科研使用。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
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