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上海研伴實(shí)業(yè)有限公司
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所 在 地上海市
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更新時(shí)間:2017-10-23 10:20:26瀏覽次數(shù):192次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 環(huán)保在線人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
Human Umbilical Vein Endothelial Cells
貨號(hào):EA,hy926
價(jià)格:¥1350.0
規(guī)格: 1*10?6?
細(xì)胞介紹
在PEG脅迫下,將原代培養(yǎng)的人臍靜脈細(xì)胞與抗硫*的A549克隆株融合,構(gòu)建了人臍靜脈細(xì)胞株, EA.hy926。 融合子在HAT培養(yǎng)基上生長并以八因子相關(guān)抗原篩選。
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
Human Umbilical Vein Endothelial Cells
貨號(hào):EA,hy926
價(jià)格:¥1350.0
規(guī)格: 1*10 6
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞介紹
在PEG脅迫下,將原代培養(yǎng)的人臍靜脈細(xì)胞與抗硫*的A549克隆株融合,構(gòu)建了人臍靜脈細(xì)胞株, EA.hy926。 融合子在HAT培養(yǎng)基上生長并以八因子相關(guān)抗原篩選。 EA.hy926已經(jīng)過100次以上的群體倍增(PDLs)。電鏡照片顯示W(wǎng)eibel-Palade小體的細(xì)胞質(zhì)分布以及組織特異性的細(xì)胞器,分化的內(nèi)皮細(xì)胞特性如血管生成,體內(nèi)平衡/血栓形成,血壓及炎癥反應(yīng)。
細(xì)胞特性
1)來源:靜脈內(nèi)皮細(xì)胞與A549細(xì)胞株融合
2)形態(tài):梭形,貼壁生長
3)含量:>1x106 個(gè)/mL
4)污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
運(yùn)輸和保存:使用含有優(yōu)質(zhì)胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細(xì)胞。收到細(xì)胞后,可在1000RPM,常溫條件下,離心5min后,于潔凈操作臺(tái)棄去上清,加入*使用的培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)移至10cm培養(yǎng)皿或者T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。
細(xì)胞用途:僅供科研使用。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H,GIBCO,貨號(hào)12800017,添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。(DMEM液體培養(yǎng)基:GIBCO,11995-065)。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
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主營產(chǎn)品:elisa試劑盒,標(biāo)準(zhǔn)品,對照品,細(xì)胞株,科研抗體,生物試劑,化學(xué)試劑,實(shí)驗(yàn)外包,科研耗材
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