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常見(jiàn)的色譜法有哪些？分別有哪些特點(diǎn)？

閱讀：1228發(fā)布時(shí)間：2022-3-24

常見(jiàn)的色譜法有哪些？分別有哪些特點(diǎn)？基于分子分離的不同需求，色譜已經(jīng)發(fā)展了多年。今天，在世界各地的實(shí)驗(yàn)室中，幾種色譜正被用于不同的目的。

紙色譜——浸泡在液體中的紙用作固定相，而液體溶劑用作流動(dòng)相。紙張干燥后，分離的成分會(huì)在紙上顯示為斑點(diǎn)。

液相色譜——該技術(shù)使用二氧化硅和氧化鋁作為固定相，有機(jī)溶劑作為流動(dòng)相。

薄層色譜法——在這里，塑料或玻璃片上涂有一薄層吸附劑，如氧化鋁(Al2O3)或二氧化硅(SiO2)。組分根據(jù)其對(duì)吸附劑的親和力進(jìn)行分離，并在色譜分離后在紙上顯示為單個(gè)斑點(diǎn)。

柱色譜——柱色譜類(lèi)似于薄層色譜，使用相同的固定相和流動(dòng)相。不同之處在于，兩個(gè)相都包含在一個(gè)垂直的玻璃柱中，分離過(guò)程非常耗時(shí)。

氣相色譜——在氣相色譜中，惰性氣體(氦氣、氮?dú)?、氬?用作流動(dòng)相，通常由硅聚合物組成的固體或液體作為固定相。樣品混合物被引入襯有固定相的柱中，并被選擇性吸附。當(dāng)分離的分子離開(kāi)色譜柱時(shí)，使用檢測(cè)器進(jìn)行識(shí)別。

高效液相色譜——高效液相色譜是柱色譜的高級(jí)形式。在高效液相色譜中，樣品混合物被引入流動(dòng)相(通常是溶劑)，然后在高壓下將其泵入緊密填充的分析柱中，以快速分離樣品分子。這種分離依賴(lài)于分子對(duì)流動(dòng)相和包裹柱(固定相)的顆粒的親和力。也叫高壓液相色譜。親和色譜–該方法用于根據(jù)不同同源成分(如酶和底物、抗原和抗體或受體和配體)之間的特定親和力分離生化混合物。

離子交換色譜——這是根據(jù)離子和極性分子對(duì)離子交換劑的親和力來(lái)分離離子和極性分子。它有助于蛋白質(zhì)、氨基酸和核苷酸等帶電分子的分離。這里，流動(dòng)相通常是導(dǎo)電溶液(由鹽濃度決定)。樣品分子對(duì)帶相反電荷的固體支持物的吸附由特定的離子性質(zhì)驅(qū)動(dòng)，例如分子上電荷的數(shù)量和位置。

分離包括不同的條件，如離子強(qiáng)度和酸堿度，以便溶質(zhì)分子按其結(jié)合強(qiáng)度的順序從柱中釋放出來(lái)，弱結(jié)合的物質(zhì)首先被洗脫。

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