PolysciencePEI 25K 是一種功能強(qiáng)大、值得信賴(lài)且具有成本效益的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染試劑。在 HEK293 和 CHO 表達(dá)系統(tǒng)中，PEI 可在大范圍內(nèi)（96 孔板到 100 L 生物反應(yīng)器）提供一致的高基因表達(dá)。每年，越來(lái)越多的研究人員和公司轉(zhuǎn)向 Polysciences PEI，以在他們的工作中獲得關(guān)鍵優(yōu)勢(shì)。相對(duì)于大多數(shù)其他選擇，使用 PEI 在內(nèi)部制備轉(zhuǎn)染試劑可以將總轉(zhuǎn)染成本降低 40%。

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品名稱(chēng):	polyscience23966-1線性聚乙烯亞胺（MW25，000）
產(chǎn)品英文名稱(chēng):	Polyethylenimine，Linear(PEI)
CAS號(hào):	9002-98-6,26913-06-4
產(chǎn)品包裝:	1g
產(chǎn)品價(jià)格:
有效期:	一年

品牌:	Polyscience
產(chǎn)地:	USA
保存條件:
純度規(guī)格:	1g
產(chǎn)品類(lèi)別:	轉(zhuǎn)染試劑

PEI轉(zhuǎn)染手冊(cè)

轉(zhuǎn)染操作流程：

1、細(xì)胞傳代：

轉(zhuǎn)染前24h內(nèi)分離293T細(xì)胞至含10％胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基中進(jìn)行傳代培養(yǎng)，接種密度如下：
        6孔板：0.5x106細(xì)胞
        10cm培養(yǎng)皿：4.0x106細(xì)胞
        15cm培養(yǎng)皿：9.0x106細(xì)胞

2、轉(zhuǎn)染

轉(zhuǎn)染前將所有試劑置于室溫。

2.1質(zhì)粒DNA的稀釋

在無(wú)菌試管中，用無(wú)血清的DMEMW/O酚紅培養(yǎng)基（濃度為10％）稀釋質(zhì)粒DNA（ug）。病毒包裝體（psPAX2）：病毒包膜（pMD2G）和重組質(zhì)粒DNA的稀釋比例分別為4:2:1。

6孔板：200ul+3ug的DNA
        10cm培養(yǎng)皿：1ml+7-8ug的DNA
        15cm培養(yǎng)皿：2ml+11-12ug的DNA

  2.2轉(zhuǎn)染復(fù)合體形成

將PEI（1ug/uL）加入已稀釋的總DNA中，PEI與DNA（ug）的混合比率為3:1。加入后立即渦旋混合。

6孔板：9ulPEI復(fù)合體（1ug/ul）=9ug
10cm培養(yǎng)皿：21ulPEI復(fù)合體（1ug/ul）=21ug
15cm培養(yǎng)皿：33ulPEI復(fù)合體（1ug/ul）=33ug
將添加到細(xì)胞的DNA/PEI的混合物在室溫下孵育15分鐘。

4、收獲轉(zhuǎn)染細(xì)胞

轉(zhuǎn)染后48小時(shí)內(nèi)收獲轉(zhuǎn)染細(xì)胞/或病毒上清。

試劑的配制：
PEI（1ug/ul）polysciences（CAT＃23966-2配制成儲(chǔ)液：)
1、將無(wú)內(nèi)毒素的無(wú)菌水加熱至80℃左右溶解PEI，冷卻到室溫。
2、調(diào)整pH值至7.0，用0.22um的濾器過(guò)濾消毒，分裝后儲(chǔ)存在-20℃。工作液可保持在4℃

polyscience，inc，成立于1961年，起家于化學(xué)但超越化學(xué)領(lǐng)域的美國(guó)制造商，總部位于賓夕法尼亞州沃靈頓，公司業(yè)務(wù)主要涵蓋三大塊：1.實(shí)驗(yàn)用產(chǎn)品：a）成千上萬(wàn)種具品牌特色的化合物和試劑，應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)室研究，組織學(xué)，電鏡和解剖病理學(xué)以及其他診斷和生命科學(xué)研究；b）種類(lèi)極其寬廣的單體和聚合體，滿(mǎn)足各方研究領(lǐng)域；c）有機(jī)/無(wú)機(jī)化合物，生物可降解材料，磁珠，熒光素，染料和特定抗體，以及常規(guī)蛋白包被顆粒（直徑范圍40nm~10mm）的重要制造工廠；d）頂端多聚化合物的供貨中心，滿(mǎn)足各種高性能工業(yè)領(lǐng)域需求，包括替代能源，汽車(chē)電子，國(guó)防&航空電子，便攜式通信和計(jì)算機(jī)，科研組裝。2.定制合成；3.cgmp生產(chǎn)服務(wù)。