上海邦景實業(yè)有限公司
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參考價 | 面議 |
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更新時間:2022-10-05 09:42:47瀏覽次數(shù):323
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細胞名稱 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0928品牌
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞系來源于一成年男性的外周血。2009年由中科院昆明細胞庫通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;5-6天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0928品牌冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0928品牌細胞傳代培養(yǎng)
一、原理 細胞在培養(yǎng)瓶長成致密單層后,已基本上飽和,為使細胞能繼續(xù)生長,同時也將細胞數(shù)量擴大,就必須進行傳代(再培養(yǎng))。 傳代培養(yǎng)也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養(yǎng)細胞進行各種實驗的必經(jīng)過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以,而貼壁細胞需經(jīng)消化后才能分 瓶。
二、材料和試劑 1、細胞:貼壁細胞株 2、試劑:0.25%、1640培養(yǎng)基(含10%小牛血清) 3、儀器和器材:倒置顯微鏡,培養(yǎng)箱、培養(yǎng)瓶、吸管、廢液缸等
三、操作步驟 1、將長滿細胞的培養(yǎng)瓶中原來的培養(yǎng)液棄去。 2、加入0.5—1ml 0.25%溶液,使瓶底細胞都浸入溶液中。 3、瓶口塞好橡皮塞,放在倒置鏡下觀察細胞。隨著時間的推移,原貼壁的細胞逐漸趨于圓形,在還未漂起時將棄去,加入10ml培養(yǎng)液終止消化。 觀察消化也可以用肉眼,當見到瓶底發(fā)白并出現(xiàn)細針孔空隙時終止消化。一般室溫消化時間約為1—3分鐘。 4、用吸管將貼壁的細胞吹打成懸液,分到另外兩到三瓶中,實踐培養(yǎng)液塞好橡皮塞,置37℃下繼續(xù)培養(yǎng)。第二天觀察貼壁生長情況。 附:消化液配制方法: 稱取0.25克蛋白酶(活力為1:250),加入100ml無Ca2+、Mg2+的Hank’s液溶解,濾器過濾除菌,4℃保存,用前可在37℃下回溫。 溶液中也可加入EDTA,使zui終濃度達0.02%。
小鼠肉瘤瘤株;S180
牛胚氣管細胞;EB (NBL-4)
LRRN3 Others Human 人 LRRN3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
A172細胞,膠質(zhì)母細胞瘤細胞 肝細胞癌,HepG2細胞 人結(jié)直腸腺癌細胞;COLO 205
人滑膜細胞RNAHS miRNA5 μg
CDH12 Others Human 人 CDH12 人細胞裂解液 (陽性對照)
人十二脂腸腺癌;HuTu-80
人骨髓間充質(zhì)干細胞(骨髓)(HMSC-bm)(5×105)
CM-R032大鼠腸靜脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL
小鼠單核巨噬細胞;J774A.1 小鼠肝動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞 Mouse
FZD10 Others Mouse 小鼠 FZD10 / Frizzled-10 / CD350 人細胞裂解液 (陽性對照)
AMPK Others Human 人 AMPK (G1/B1/A1) Heteroimer 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴淋巴細胞;B95-8
CL-0209SHZ-88(大鼠癌細胞)5×106cells/瓶×2
3T3-L1, 小鼠前脂肪細胞 小鼠肝癌細胞,HEPA1-6細胞 FO(骨髓瘤細胞)
人腎透明細胞癌;Caki-1
EFNB1 Others Human 人 EphrinB1 / EFNB1 人細胞裂解液 (陽性對照)
StrainStoreMedium
Potato glucose agar 馬鈴薯葡萄糖瓊脂 1.10130.0500 MERCK默克 incubation media Potato glucose agar 馬鈴薯葡萄糖瓊脂 1.10130.0500 MERCK默克
改良CCD瓊脂基礎(chǔ) 250g 用于空腸彎曲菌的選擇分離培養(yǎng)(GB、ISO),每100mL基礎(chǔ)培養(yǎng)基需添加1支配套試劑
小鼠胚胎干細胞無血清培養(yǎng)基Mediumwithoutserumofmouseembryonicstemcells
BufferedPower-nitratemedium
EF-18 瓊脂 EF-18 Agar 250 用于濾膜法檢測食品中沙門氏菌(SN/T1059.1)
EEM培養(yǎng)基 EEM medium 250 用于致病性大腸桿菌的增菌培養(yǎng)和腸桿菌的增菌培養(yǎng)(Japan方法)
EC 肉湯 E.Coli Broth 250 用于糞大腸菌群、大腸桿菌的測定(SN標準)
DTM培養(yǎng)基 DTM Medium 250 用于食品中真菌的培養(yǎng)(Merck方法)
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0928品牌PlateCountAgar
培養(yǎng)基(改良高氏1號) 250g 用于的分離培養(yǎng)
D-環(huán) 0.1g/支*2 加入250ml TSC瓊脂基礎(chǔ)中
改良胰蛋白胨大豆肉湯(mTSB)基礎(chǔ)250g/瓶用于O選擇性增菌,每225ml培養(yǎng)基中添加incubationmedia改良胰蛋白胨大豆肉湯(mTSB)基礎(chǔ)250g/瓶用于O選擇性增菌,每225ml培養(yǎng)基中添加1601
RoseBengalMedium
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0928品牌注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細胞只能用于科研,不得用于臨床應用。