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上海邦景實業(yè)有限公司

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線粒體活性氧產(chǎn)生速率測試盒100管/96樣 分子生物試劑
線粒體活性氧產(chǎn)生速率測試盒100管/96樣 分子生物試劑
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更新時間:2023-02-06 09:31:24瀏覽次數(shù):319

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【簡單介紹】
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商品介紹:

測定意義
 
活性氧(Reactive oxygen   species, ROS)包括超氧自由基、過氧化氫、及其下游產(chǎn)物過氧化物和羥化物等,研究表明,機體95%以上的活性氧(ROS)都來自于線粒體,其失衡所致的氧化應(yīng)激與細胞生長增殖、發(fā)育分化、衰老和凋亡以及許多生理和病理過程有關(guān)。

正常情況下,細胞內(nèi)抗氧化防御系統(tǒng)與氧自由基處于平衡狀態(tài),細胞內(nèi)活性氧(ROS)水平維持在較低的生理范圍;在病理情況下,細胞內(nèi)抗氧化系統(tǒng)與氧自由基的平衡被打破,細胞內(nèi)活性氧水平過多,就可破壞線粒體酶類、脂類和核酸,使機體出現(xiàn)氧化應(yīng)激,同時,活性氧還可攻擊線粒體DNA產(chǎn)生氧化損傷,導致線粒體ATP合成減少、線粒體膜電位破壞等結(jié)構(gòu)和功能變化。

因此,通過檢測活性氧的變化來判斷線粒體的功能是否正常具有重要意義。

測定原理:

熒光探針-還原型二氯熒光素 (2', 7'-dichlorodihy drofluorescin diacetate, DCFH-DA)可擴散通過線粒體膜,在線粒體內(nèi)被酯酶水解,形成無熒光的DCFH,DCFH迅速與ROS反應(yīng)生成熒光物—氧化型二氯熒光素(2', 7'-dichlo rofluorescin, DCF)。 根據(jù)上述原理設(shè)計了利用熒光法直接定量檢測線粒體ROS產(chǎn)生速率的方法。將熒光強度隨時間變化的數(shù)據(jù)點擬合,線性回歸直線斜率與ROS產(chǎn)生的速率呈正比。

需自備的儀器和用品:

多功能酶標儀、恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調(diào)式移液器、冰、蒸餾水。

生化法檢測試劑盒:分光光度法、微量法、比色法、酶標法、高液相色譜法,自主,專業(yè)技術(shù)團隊,操作簡便快捷,規(guī)格合理、系列成套,價格合理,是廣大科研工作者的選擇,詳細產(chǎn)品咨詢:
產(chǎn)品名稱:線粒體活性氧產(chǎn)生速率測試盒100/96
產(chǎn)品規(guī)格:100/96
檢測方法:熒光法
產(chǎn)品貨號:BJ-01S9599

實驗結(jié)果判斷我有妙招:
1
、定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。產(chǎn)品僅用于科研
2
、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD+23SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3
、以PN(陽性孔OD值/陰性孔OD)大于或等于21為陽性,PN值小于21,但大于15為可疑,PN小于15為陰性。
4
ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠離水源保存。
易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

優(yōu)點如下:
  1
、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
  2
、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
  3
、穩(wěn)定性好:試劑盒28℃存放6個月有效。
  4
、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
  5
、回收試驗: X =103.3%。
  6
、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。

樣品制備:
  1
. 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
  2
. 過濾混濁溶液。
  3
. 除去樣品中的CO 2 (通過過濾)。
  4
. 通過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
  5
. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
  6
. 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
  7
. PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
  8
. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
  9
. Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
  10
.含脂肪的樣品用熱水提取。


特點為:
1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
2)靈敏度高
由于相應(yīng)學科的發(fā)展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準確度一致*是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標準參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標準方法。
3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當?shù)娘@色條件就可直接進行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。
4)準確度高
對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。
5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預富集后)。
6)分析成本低、操作簡便、快速 。
香蕉炭疽盤長孢菌

地霉屬

戊糖乳桿菌

光滑念珠菌KTCC0001凍干粉

頭狀絲孢酵母

抗輻射鏈霉菌
2
,35- 標準品 Cadusafos 697-82-5 純品型,0.25G

2,4,4-Trimethyl-2-pentene,certified 標準品 Vancomycinhydrochloride 107-40-4 純品型,1ml

2,4,4-Trimethyl-1-pentene,certified Chlorobenzilate 107-39-1 純品型,1ML
停乳鏈球菌

園弧青霉=桔灰青霉

蘇云金芽胞桿菌日本亞種Bacillusthuringiensissubsp.japanensis

緩沖蛋白胨水90ml/

靈芝(紅芝,赤芝)

不動桿菌
苯氧乙酸 標準品 Perfluorobutanesulfonicacid 122-59-8 純品型,0.25G

右旋反式苯氧司林/吩斯 標準品 m-Terphenyl 26046-85-5 純品型,0.1g

苯醚菊酯 標準品 sec-Pentylbenzene(sec-Amylbenzene) 26002-80-2 純品型,0.1g
線粒體活性氧產(chǎn)生速率測試盒100/96丙酮酸脫羧酶(PDC)測試盒

醇脫氫酶(ADH)測試盒

醇脫氫酶(ADH)測試盒

單脫氫抗壞血酸還原酶(MDHAR)測試盒

乙醛脫氫酶(ALDH)試劑盒




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