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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司

主營(yíng)產(chǎn)品： 進(jìn)口elisa試劑盒，細(xì)胞株，細(xì)胞系，菌種

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NAD蘋果酸酶測(cè)試盒50管/48樣分子生物試劑

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更新時(shí)間：2023-03-03 09:21:42瀏覽次數(shù)：296

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【簡(jiǎn)單介紹】

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生化法檢測(cè)試劑盒：分光光度法、微量法、比色法、酶標(biāo)法、高液相色譜法，自主，專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)，操作簡(jiǎn)便快捷，規(guī)格合理、系列成套，價(jià)格合理，是廣大科研工作者的選擇，詳細(xì)產(chǎn)品咨詢：
產(chǎn)品名稱：NAD蘋果酸酶測(cè)試盒50管/48樣
產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣
檢測(cè)方法：紫外分光光度法
產(chǎn)品貨號(hào)：BJ-01S9549
商品介紹：

測(cè)定意義
ME廣泛存在于微生物、培養(yǎng)細(xì)胞、動(dòng)物和植物胞漿中，尤其在植物組織中活性較高。ME催化蘋果酸氧化脫羧的可逆反應(yīng)，產(chǎn)生丙酮酸和CO2，以及伴隨NAD(P)+的還原反應(yīng)，是蘋果酸代謝的關(guān)鍵酶。ME活性與生物合成和抗氧化密切相關(guān)。近年來(lái)植物ME活性測(cè)定較多，已經(jīng)成為抗氧化研究的熱點(diǎn)。根據(jù)輔酶專一性和對(duì)底物特異性的不同，可將ME分為NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。

測(cè)定原理：

NAD-ME催化NAD+還原成NADH，在340nm下測(cè)定NADH增加速率。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿和蒸餾水。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招：
1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。產(chǎn)品僅用于科研
2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3、以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性，P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑，P／N小于1．5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照，與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求：
① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封，放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣，水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封，并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑，應(yīng)將其固體或晶體密封保存，不宜長(zhǎng)期存放其水溶液，亞硫酸，氫硫酸溶液要密封存放，鉀，鈉，白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存，其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng)，所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封，放于陰涼通風(fēng)處保存。

優(yōu)點(diǎn)如下：
1、快速簡(jiǎn)便：全程約50分鐘，可測(cè)100例左右樣本。
2、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
3、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個(gè)月有效。
4、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
5、回收試驗(yàn)： X =103.3%。
6、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復(fù)性強(qiáng)。

樣品制備：
1）. 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品，體積可達(dá)2.000ml。
2）. 過(guò)濾混濁溶液。
3）. 除去樣品中的CO 2 （通過(guò)過(guò)濾）。
4 ）. 通過(guò)加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。
6 ）. 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。
7 ）. 用PVPP（聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。
9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10）.含脂肪的樣品用熱水提取。

特點(diǎn)為：
（1）應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見(jiàn)區(qū)都有吸收，因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止，幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素（除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外）均可采用此法。
（2）靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展，使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展，從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究，使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言，光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用，在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中，它更受重視，很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
（3）選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定，如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定，已有比較滿意的方法了。
（4）準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō)，其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi)，如采用示差分光度法測(cè)量，則誤差往往可減少到千分之幾。
（5）適用濃度范圍廣
可從常量（1-50%）（尤其是使用示差法）到痕量（10-6-10-8%）（經(jīng)預(yù)富集后）。
（6）分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速。
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