上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: 進(jìn)口elisa試劑盒,細(xì)胞株,細(xì)胞系,菌種 |
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- www.bhsy-e.com/
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更新時(shí)間:2023-03-16 09:58:47瀏覽次數(shù):180
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中文名稱:pTG-T載體連接試劑盒
英文名稱:pTG-T Vector Ligation Kit
產(chǎn)品規(guī)格:20次|60次
發(fā)貨周期:1~3天
產(chǎn)品貨號(hào):BJ-F0164745
產(chǎn)品介紹:
本試劑盒適用于PCR產(chǎn)物的克隆,可將PCR產(chǎn)物連接到pTG-T載體上,便于進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。DNA片段連接是經(jīng)常出問題的步驟,為了提高連接效率,本試劑盒提供了兩種連接Buffer供不同情況選擇:10×Ligation Buffer Ⅰ適合置于16℃連接過夜,可獲得佳連接效果;2×Ligation Buffer Ⅱ?yàn)榭焖龠B接Buffer,25℃連接10分鐘即可轉(zhuǎn)化,快捷方便。 英文名稱:pTG-T Vector Ligation Kit 產(chǎn)品規(guī)格:20次|60次 本試劑盒適用于PCR產(chǎn)物的克隆,可將PCR產(chǎn)物連接到pTG-T載體上,便于進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。DNA片段連接是經(jīng)常出問題的步驟,為了提高連接效率,本試劑盒提供了兩種連接Buffer供不同情況選擇:10×Ligation Buffer Ⅰ適合置于16℃連接過夜,可獲得佳連接效果;2×Ligation Buffer Ⅱ?yàn)榭焖龠B接Buffer,25℃連接10分鐘即可轉(zhuǎn)化,快捷方便。 pTG-T是一種高效克隆PCR產(chǎn)物的專用載體,它是由一種克隆載體在EcoRV酶切位點(diǎn)處切開,在兩側(cè)的3′端添加T而成。由于大部分耐熱聚合酶反應(yīng)時(shí)都會(huì)在PCR產(chǎn)物的3′端添加一個(gè)A,可與pTG-T 3′端的T互補(bǔ)連接,因此可大大提高PCR產(chǎn)物的連接和克隆效率。連接使用的PCR片段3′端應(yīng)帶有A末端,如果是使用pfu等高保真聚合酶擴(kuò)增的不帶A末端的片段,應(yīng)使用平末端連接試劑盒先加A末端后再連接。 帶有插入片段的重組子可根據(jù)α互補(bǔ)原理,進(jìn)行藍(lán)白斑篩選,判斷載體中有無外源基因的插入(白色克隆為陽性重組克隆,藍(lán)色的為載體自連的克隆,具體篩選原理參考分子克隆等書籍)。克隆后,可使用通用引物T7、SP6進(jìn)行測(cè)序。 保存條件:-20℃保存,避免反復(fù)凍融(載體和連接試劑可以適當(dāng)?shù)姆盅b成小份,防止反復(fù)凍融,以保證質(zhì)量)。 |
使用方法:本產(chǎn)品僅用于科研
注意:標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個(gè)人防護(hù)。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級(jí)容器)。
鼻拭子的采集:將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處,停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集:用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁,將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
直接在一級(jí)容器上用油性記號(hào)筆寫明樣本的種類、采樣時(shí)間、編號(hào)、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封;每袋裝一份標(biāo)本。同時(shí)也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上,連同一級(jí)容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級(jí)容器)內(nèi),擰緊蓋,在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本,可以放在同一個(gè)二級(jí)容器內(nèi)。二級(jí)容器要承受不少于95 KPa的壓力,內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險(xiǎn)標(biāo)注。
將二級(jí)容器擺放在專用運(yùn)輸箱內(nèi)(或疫苗運(yùn)輸箱),放入冰排,然后以柔軟物質(zhì)填充,并密封,由專人(2人)運(yùn)送,不得郵寄,最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時(shí)內(nèi)送達(dá),則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的,需在4℃冰箱短時(shí)間暫存,并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃~-40℃時(shí)不穩(wěn)定,故長(zhǎng)期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。
動(dòng)物細(xì)胞周期G2期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒
動(dòng)物細(xì)胞周期M期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒
通用型動(dòng)物細(xì)胞周期(G1/S和G2/M期)同步(SYNCHRONY)處理試劑盒
植物細(xì)胞周期G0期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒
植物細(xì)胞周期G1早期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒
小鼠脂聯(lián)素(ADP)elisa ,英文名: ADP ELISA Kit
小鼠血管緊張素原(aGT)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouseangiotensinogen,aGTELISAKit 96T/48T
人卷曲螺旋, 肌球蛋白樣BCL2 結(jié)合蛋白/自噬基因Beclin 1(BECN1)免疫試劑盒 Human BECN1 ELISA Kit
Ratadiponectin,ADPELISAKit大鼠脂聯(lián)素(ADP)elisa規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞TNFBETA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次
Mouse17-Hydroxycoicosteroids,17-OHCSelisa小鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)elisa規(guī)格:96T/48T
pTG-T載體連接試劑盒直接紅素D-BIL試劑盒化學(xué)氧化法 96T 微板法
脂質(zhì)過氧化物LPO含量測(cè)試盒 20T 50T 100T 比色法
脂肪組織蛋白提取試劑盒50T
脂肪組織蛋白提取試劑盒100T
脂肪酸合成酶(FAS)測(cè)試盒
生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中,常常需要從液體樣品(如血漿,培養(yǎng)基)中純化病毒,但由于病毒顆粒十分細(xì)小,傳統(tǒng)的分離方法是使用長(zhǎng)時(shí)間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來,此操作非常繁瑣,并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn),本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。