上海邦景實業(yè)有限公司
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參考價 | 面議 |
- 型號
- 品牌 其他品牌
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- 所在地 上海市
更新時間:2023-02-20 09:58:21瀏覽次數(shù):225
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商品介紹:
名稱 PC-3M IE8 (人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細胞株)
別稱 PC-3M IE8; PC-3M-IE8; PC3M-1E8; PC3M-IE8; 1E8-H
年齡(性別) 62歲
生長特性 貼壁細胞
細胞形態(tài) 上皮細胞樣;多角形
背景描述 PC-3M IE8細胞是一株由母系細胞PC-3M經(jīng)單細胞克隆法分離鑒定的高轉(zhuǎn)移亞系;PC-3M IE8細胞在裸鼠體內(nèi)成瘤率100%,轉(zhuǎn)移率100%。
生長培養(yǎng)基 RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
凍存條件
凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 | 貨號 |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 細胞系 | BJ-X96732 |
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣,如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
| 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
Dihydrorhodamine 123 10mg DNA 電泳分子量標準 (2)(50-400 bp)50 次
DiI( 細胞膜紅色熒光探針 )10mg DNA 電泳分子量標準 (2)(300-5000 bp)50 次
DiIC1(5) 碘化物100mg DNA 電泳分子量標準 (100-600 bp)50 次
DiIC12(3) 高氯酸化物100mg DNA 電泳分子量標準 (100-5000 bp)50 次
DiO( 細胞膜綠色熒光探針 )10mg DNA 電泳分子量標準 (100-200 bp)50 次
大鼠1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)elisa檢測試劑盒
大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)elisa檢測試劑盒
大鼠1,25-二羥D(3)24-羥化酶,線粒體(CYP24A1)elisa檢測試劑盒免費代測
大鼠1,25二羥基D3(1,25 DHVD3)elisa檢測試劑盒
大鼠 SCUBE1 elisa檢測試劑盒
人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細胞株:PC-3M IE8大鼠Smad1 elisa分析檢測試劑盒
大鼠Smad1 elisa檢測試劑盒免費代測
大鼠Smad7 elisa分析檢測試劑盒
大鼠Smad7 elisa檢測試劑盒
大鼠Smad同源物1(Smad1)elisa檢測試劑盒
我司全程提供細胞生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應用、組織、凍存條件等復蘇及凍存細胞株說明書信息,我們專業(yè)您的細胞系實驗,讓您實驗再無煩擾!產(chǎn)品僅用于科研