上海邦景實業(yè)有限公司
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更新時間:2023-06-17 09:51:14瀏覽次數(shù):177
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操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
商品屬性:
產品名稱:人髓性單核細胞白血病細胞:MV-4-11
貨號:BJ-X96879
規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
分類:細胞系
商品介紹:
名稱 MV-4-11 (人髓性單核細胞白血病細胞) 年齡(性別) 10歲 組織來源 外周血 生長特性 懸浮細胞 細胞形態(tài) 淋巴母細胞樣 生物安全等級 1 生長培養(yǎng)基 IMDM+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例 3×10^5-5×10^5cells/mL 推薦換液頻率 2~3次/周 凍存條件 凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ 注意事項 該細胞為懸浮細胞,請注意離心收集細胞懸液;請勿直接倒掉細胞培養(yǎng)液。 保藏機構 ATCC; CRL-9591 DSMZ; ACC-102 |
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:產品僅用于科研
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
L型鈣通道蛋白a1亞型3抗體
L型鈣通道蛋白a1亞型6抗體
P450 2B6抗體
后期促進復合蛋白3抗體
磷酸化細胞分裂周期蛋白25抗體
FITC標記的錨蛋白重復結構域蛋白11抗體
FITC標記的細胞核重定位及紡錘體檢查點蛋白AMN1抗體
FITC標記的粘附分子IgG樣結構域蛋白3抗體
FITC標記的肌側索硬化癥相關蛋白4抗體
FITC標記的天連接糖基化11抗體
人髓性單核細胞白血病細胞:MV-4-11大鼠不對稱二甲基(ADMA)elisa分析檢測試劑盒
大鼠不對稱二甲基(ADMA)elisa檢測試劑盒
大鼠層連蛋白(Laminin)elisa檢測試劑盒
大鼠層連蛋白/板層素(LN)elisa分析檢測試劑盒
大鼠層連蛋白/板層素(LN)elisa檢測試劑盒