上海邦景實業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品: 進口elisa試劑盒,細胞株,細胞系,菌種 |
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參考價 | 面議 |
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- 品牌 其他品牌
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- 所在地 上海市
更新時間:2023-07-01 09:07:10瀏覽次數(shù):233
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商品屬性:
產(chǎn)品名稱:人B淋巴瘤細胞:Farage
貨號:BJ-X96831
規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
分類:細胞系
商品介紹:
名稱 Farage (人B淋巴瘤細胞) 種屬 人類 年齡(性別) 成人 組織來源 源自轉移部位:淋巴結 生長特性 懸浮細胞 細胞形態(tài) 淋巴母細胞樣 生物安全等級 2 生長培養(yǎng)基 RPMI-1640+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例 3×10^5-5×10^5cells/mL 推薦換液頻率 2~3次/周 凍存條件 凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ 注意事項 該細胞為懸浮細胞,請注意離心收集細胞懸液;請勿直接倒掉細胞培養(yǎng)液。 保藏機構 ATCC; CRL-2630 |
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:產(chǎn)品僅用于科研
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
n- 十二烷基 -β-D- 麥芽糖苷1g MQAE( 氯離子熒光探針 )20mg
脫氧膽酸5g Monobromobimane [mBBR]25mg
膽酸5g Monensin ( 蛋白轉運抑制劑 )100mg
十二烷基磺酸100g MnCl2溶液,25mM,PCR 級5mL
去垢劑去除樹脂10mL MM4-64(FM®4-64)1mg
FITC標記的膜粘連蛋白9抗體
FITC標記的腺苷A2b受體/神經(jīng)生長因子1受體抗體
FITC標記的α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體
FITC標記的整合素樣金屬與樣4蛋白抗體
FITC標記的整合素樣金屬與樣3蛋白抗體
人B淋巴瘤細胞:Farage大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)elisa檢測試劑盒免費代測
大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)elisa分析檢測試劑盒
大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)elisa檢測試劑盒
大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素受體(ACTHR)elisa檢測試劑盒
大鼠促腎上腺皮質(zhì)素釋放激素結合蛋白(CRHBP)elisa檢測試劑盒
操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。