上海邦景實業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品: 進(jìn)口elisa試劑盒,細(xì)胞株,細(xì)胞系,菌種 |
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更新時間:2023-09-21 09:53:08瀏覽次數(shù):210
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Oligo(dT) 纖維素25mg 柱式動物 RNA-DNA 雙提試劑盒50 次
Oligo(dT) 再生溶液100mL 柱式動物 DNAout50 次
鏈霉親和素磁珠2mL 柱式凋亡 DNAout50 次
固相 RNase 清除劑100mL 柱式病毒 RNAout50 次
商品屬性:
產(chǎn)品名稱:小鼠牙齦成纖維細(xì)胞
貨號:BJ-X97720
規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
分類:原代細(xì)胞
商品介紹:
名稱 小鼠牙齦成纖維細(xì)胞 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介: 小鼠牙齦成纖維細(xì)胞分離自牙齦組織;牙齦是附著在牙頸和牙槽突部分的粘膜組織,呈粉紅色、有光澤、質(zhì)堅韌。牙齦邊緣稱為齦緣,正常呈月芽形。齦緣與牙頸之間的小溝稱齦溝。兩鄰牙之間的牙齦突起稱齦乳突。也叫齒齦,通稱牙床;是指包住齒頸的黏膜組織,粉紅色,內(nèi)有很多血管和神經(jīng)。牙齦表面為復(fù)層鱗狀上皮,有角化層或不全角化層。上皮釘較長,伸入結(jié)締組織。牙齦上皮不僅覆蓋牙齦外露部分,而且也轉(zhuǎn)向內(nèi)側(cè),覆蓋齦溝壁稱為溝內(nèi)上皮;一部分附著在牙體上稱為結(jié)合上皮。牙齦的固有層為各種方向交織的結(jié)締組織纖維束,其中主要的成分是膠原纖維,它占全部結(jié)締組織56%。牙齦中為數(shù)多的細(xì)胞為成纖維細(xì)胞,肥大細(xì)胞也常在牙齦中出現(xiàn),此外還有淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。 5.方法簡介: 公司實驗室分離的小鼠牙齦成纖維細(xì)胞采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測: 公司實驗室分離的小鼠牙齦成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣 傳代特性 可傳1-3代左右 消化液 0.25% 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:產(chǎn)品僅用于科研
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。
NADPH-還原酶(NCR)測試盒
氨基-N-去甲基化酶(AND)測試盒
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苯胺-4羥化酶(AH)測試盒
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大鼠免疫球蛋白樣EGF樣域激酶1(Tie1)elisa檢測試劑盒
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大鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(AMH)elisa檢測試劑盒
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