上海邦景實業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品: 進口elisa試劑盒,細胞株,細胞系,菌種 |
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更新時間:2022-06-08 11:26:26瀏覽次數(shù):252
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中文名稱:一步法RT-PCR試劑盒
英文名稱:One-Step RT-PCR Kit
產(chǎn)品規(guī)格:50T|200T
發(fā)貨周期:1~3天
產(chǎn)品貨號:BJ-F0164228
生物醫(yī)學實驗中,常常需要從液體樣品(如血漿,培養(yǎng)基)中純化病毒,但由于病毒顆粒十分細小,傳統(tǒng)的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來,此操作非常繁瑣,并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點,本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。產(chǎn)品介紹:
本品是一步法One-Step RT-PCR反應(yīng)的專用試劑,反應(yīng)過程在同一管內(nèi)連續(xù)進行,避免開管,能有效防止污染。本品含有高溫反轉(zhuǎn)錄酶(RNase H-)和新型熱啟動酶,采用優(yōu)化配方的專用Buffer,具有更高的反轉(zhuǎn)錄和PCR擴增效率,適合于低濃度RNA模板的高靈敏度擴增。 本制品先采用反轉(zhuǎn)錄酶以RNA為模板合成cDNA,然后再以合成的cDNA為模板,經(jīng)過PCR擴增反應(yīng)的熱變性、引物退火、鏈延伸三個步驟循環(huán)往復(fù),在短時間內(nèi)擴增得到大量DNA片段,擴增得到的目的產(chǎn)物3'末端含有一個A堿基,可直接用于T/A克隆。 |
使用方法:本產(chǎn)品僅用于科研
注意:標本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集:將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處,停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集:用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁,將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封;每袋裝一份標本。同時也將標本有關(guān)信息填在標本送檢表上,連同一級容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內(nèi),擰緊蓋,在容器上標明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標本,可以放在同一個二級容器內(nèi)。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力,內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險標注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(nèi)(或疫苗運輸箱),放入冰排,然后以柔軟物質(zhì)填充,并密封,由專人(2人)運送,不得郵寄,最好使用專車。
采集的標本若不能在24小時內(nèi)送達,則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的,需在4℃冰箱短時間暫存,并盡快聯(lián)系遞送標本。流感病毒在-20℃~-40℃時不穩(wěn)定,故長期保存最好在-70℃溫度以下進行。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
冰凍切片網(wǎng)硬蛋白(RETICULIN)染色試劑盒
石蠟切片透明質(zhì)酸染色試劑盒
冰凍切片透明質(zhì)酸染色試劑盒
細胞糖原高碘酸希爾(PAS)法染色試劑盒
石蠟切片糖原(DIASTASE)法染色試劑盒
兔子內(nèi)皮抑素(ES)ELISAKit 8-Phenyloctanol 10472-97-6 中文名:8-辛醇 分子式:C14H22O
兔子內(nèi)皮抑素(ES)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 1,6,2',3',6'-O-Pentaacetyl-3-O-trans-p-coumaroylsucrose 中文名: 分子式:C31H38O18 度:98.0%
兔子內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)elisa 8-Phenyloctanol 中文名:8-辛醇 分子式:C14H22O
兔子內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)ELISAKit 9,17-Octadecadiene-12,14-diyne-1,11,16-triol 中文名: 分子式:C18H26O3 度:%
兔子內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 1,5-Pentanediol diacrylate 36840-85-4 中文名: 分子式:C11H16O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
一步法RT-PCR試劑盒甲基橙(IND) Methyl orange 質(zhì)量規(guī)格:IND 英文名稱Human17-KSELISAKIT人17-同皮質(zhì)類(17-KS)規(guī)格:96T/48T
甲基紅鈉鹽(IND) Methyl Red salt 質(zhì)量規(guī)格:IND 糞便傷(SalmonellaTyphi)定量PCR擴增檢測試劑盒20
甲基紅鈉鹽(ACS reagent,95 %) Methyl Red salt 質(zhì)量規(guī)格:ACS reagent,95 % ELISAKitAIL-R4人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4規(guī)格:48T/96T
間甲基紅 m-Methyl red 質(zhì)量規(guī)格:指示劑 小鼠膜聯(lián)蛋白A1(ANXA1)elisa ,英文名: ANXA1 ELISA Kit
紫脲酸銨(IND) Murexide 質(zhì)量規(guī)格:IND 人胸腺非依賴性抗原(TI-Ag)ELISA檢測試劑盒Humahymusindependeaigen,TI-AgELISAKit 96T/48T
紫脲酸銨(ACS) Murexide 質(zhì)量規(guī)格:ACS 大鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)試劑盒 Rat Insulin-like growth factor 2,IGF-2 ELISA Kit
甲基紫,龍紫 methyl violet 質(zhì)量規(guī)格:BS 英文名稱Human17-HydroxycoicosteroidsELISAKIT人17-羥皮質(zhì)類(17-OHCS)規(guī)格:96T/48T
硝氮黃 Nitrazine yellow 質(zhì)量規(guī)格:IND 糞便傷(SalmonellaTyphi)定性試劑盒20
中性紅 Neutral red 質(zhì)量規(guī)格:BS ELISAKitAIL-R3人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3規(guī)格:48T/96T
橙黃Ⅳ Orange Ⅳ 質(zhì)量規(guī)格:IND 小鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)elisa ,英文名: ANX-Ⅴ ELISA Kit