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上海邦景實業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品： 進口elisa試劑盒，細(xì)胞株，細(xì)胞系，菌種 |
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- www.bhsy-e.com/
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更新時間：2022-06-07 11:31:47瀏覽次數(shù)：204
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中文名稱：2×Fast Pfu PCR MasterMix
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：1ml
發(fā)貨周期：1～3天
產(chǎn)品貨號：BJ-F0164129
生物醫(yī)學(xué)實驗中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養(yǎng)基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細(xì)小，傳統(tǒng)的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點，本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。產(chǎn)品介紹：
本制品是將PCR反應(yīng)所需的Fast Pfu酶、dNTP、MgCl2、反應(yīng)緩沖液以及優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑，預(yù)先配制成2倍濃度的混合物。2×Fast Pfu PCR MasterMix專為擴增克隆DNA片段優(yōu)化，高保真，錯誤率僅為1.3x10-6。使用時只需在加入模板和引物并稀釋到1倍濃度即可進行PCR反應(yīng)，非常方便。較普通Pfu酶，2×Fast Pfu PCR MasterMix具有快速、高靈敏度、抗力等特點，能獲得更理想的擴增結(jié)果，并大幅度縮短擴增反應(yīng)時間。 本制品用于要求保真度比較高的PCR反應(yīng)，包括克隆PCR、DNA片段拼接、引入突變、全基因合成等。 產(chǎn)品特點： 高保真：具有同Pfu酶相同的保真度，為普通Taq酶的10倍。 快速：Fast Pfu擴增速度為普通Pfu酶的數(shù)倍，72℃保溫30秒可延伸1kb以上。 靈敏：可從0.05ng人基因組DNA模板中擴增出特定基因片段 快捷：PCR反應(yīng)所必需試劑全集于一管之中，數(shù)分鐘即可完成反應(yīng)體系配制。 便：10μl,25μl或50μl體系全部適用。 使用建議： Fast Pfu DNA聚合酶產(chǎn)生的PCR產(chǎn)物為平滑末端，無3′端"A"突出，其PCR產(chǎn)物的克隆有兩種方案： 1、PCR前引物進行5′端加磷修飾或?qū)?/span>PCR產(chǎn)物磷酸化處理后再直接克隆于平滑末端的載體中。 2、將產(chǎn)物3′末端加A后再與T載體連接。 由于Fast Pfu DNA聚合酶的校對活性可引起引物從3′端被部分降解。因此在設(shè)計引物時應(yīng)適當(dāng)增加引物的長度，理想的引物長度為20-30bp 堿基。另外為了減少由3′- 5′外切酶活性引起的引物降解，盡量在冰上配制反應(yīng)體系。 |
使用方法：本產(chǎn)品僅用于科研
注意：標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封；每袋裝一份標(biāo)本。同時也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上，連同一級容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內(nèi)，擰緊蓋，在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本，可以放在同一個二級容器內(nèi)。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力，內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險標(biāo)注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(nèi)(或疫苗運輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質(zhì)填充，并密封，由專人(2人)運送，不得郵寄，最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時內(nèi)送達(dá)，則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的，需在4℃冰箱短時間暫存，并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃～-40℃時不穩(wěn)定，故長期保存最好在-70℃溫度以下進行。
注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
動物細(xì)胞線粒體F型ATP酶（F type ATPase）活性比色法
動物組織線粒體F型ATP酶（F type ATPase）活性比色法
植物葉綠體F型ATP酶（F type ATPase）活性比色法
細(xì)菌F型ATP酶（F type ATPase）活性比色法定量檢測試劑盒
酵母F型ATP酶（F type ATPase）活性比色法定量檢測試劑盒
rabbitLeptin,LEPELISAKit 兔子瘦素(LEP)elisa 96T/48T 進口分裝 2-Amino-4-methylbenzothiazole 中文名：2-氨基-4-并噻唑 分子式：C8H8N2S 度：98.0%
rabbitiestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISAKit 兔子腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)elisa 96T/48T 進口分裝 2-Acetyl-3-ethylpyrazine 中文名：2-乙?；?/span>-3-乙基吡嗪 分子式：C8H10N2O 度：99.0%
rabbitIerleukin8,IL-8ELISAKit 兔子白介素8(IL-8/CXCL8)elisa 96T/48T 進口分裝 2-Amino-3-hydroxyanthraquinone 117-77-1 中文名：2-氨基-3-羥基蒽醌 分子式：C14H9NO3 度：98.0%
rabbitIerleukin6,IL-6ELISAKit 兔子白介素6(IL-6)elisa 96T/48T 進口分裝 2-Amino-4'-fluorobenzophenone 3800/6/4 中文名： 分子式：C13H10FNO 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
rabbitIerleukin4,IL-4ELISAKit 兔子白介素4(IL-4)elisa 96T/48T 進口分裝 2-Amino-5-mercapto-1,3,4-thiadiazole 中文名：2-氨基-5-巰基-1,3,4-噻二唑 分子式：C2H3N3S2 度：98.0%
2×Fast Pfu PCR MasterMix加蘭他敏 無 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱RatMBPELISAKit大鼠髓0脂堿蛋白(MBP)規(guī)格：96T/48T
甲基蓮心堿 Neferine 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 化妝品氨含量光譜法定量檢測試劑盒20
5-O-甲基維斯阿米醇苷 5-O-Methylvisammioside 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 ELISAKitAngiotensinase人血管緊張肽酶規(guī)格：48T/96T
N-甲基野靛堿 N－Methylcytisine 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠含IQ基元GTP酶激活蛋白1(IQGAP1)elisa ，英文名： IQGAP1 ELISA Kit
9-甲氧基 9-Methoxycamptothecin 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 人胸腺白血病抗原(TLa)ELISA檢測試劑盒Humahymus-leukemiaaigen,TLaELISAKit 96T/48T
10-姜酚 10-Gingerol 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)試劑盒 Rat Glycogen phosphorylase MM,GP-MM ELISA Kit
6-姜酚 6-gingerol 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱RatMBPELISAKit大鼠髓0脂堿蛋白(MBP)規(guī)格：96T/48T
8-姜酚 8-Gingerol 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 化妝品氨熒光定量檢測試劑盒20
姜酮 Zingerone 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 ELISAKitACE人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶規(guī)格：48T/96T
姜酮 Zingerone 質(zhì)量規(guī)格：GC≥98%,進口分裝 小鼠海藻糖酶(EH)elisa ，英文名： EH ELISA Kit
