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上海邦景實業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品： 進口elisa試劑盒，細胞株，細胞系，菌種 |
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更新時間：2022-06-07 10:16:19瀏覽次數(shù)：336
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中文名稱：高保真平末端pfu DNA聚合酶
英文名稱：pfu DNA Polymerase
產(chǎn)品規(guī)格：100U(40μl)|5×100U(5×40μl)
發(fā)貨周期：1～3天
產(chǎn)品貨號：BJ-F0164053
產(chǎn)品介紹：
本品是嗜熱古細菌來源的DNA聚合酶，該酶除具有5’-3’DNA聚合酶活性外，還具有很的3’-5’外切酶活性，增了PCR擴增的保真度。與Taq酶相比，pfu聚合酶熱穩(wěn)定性更好，更能忍耐較高的變性溫度。Pfu的保真性是Taq DNA聚合酶的10-15倍。延伸速度為0.5kb/分鐘。PCR產(chǎn)物3’端不帶堿基A，為平滑末端，要通過平滑末端克隆法進行克隆。適用于高保真的DNA片段的擴增、DNA片段的平滑化。 注意事項： 1、pfu 酶具有 3’-5’的外切酶活性，所以 pfu 酶擴增時延伸速度遠比 Taq 酶低，應根據(jù)擴增產(chǎn)物的長度設置相應的延伸時間，一般情況下 pfu 酶的延伸速度為每分鐘 0.5kb；同時 pfu 酶的 3’-5’的外切酶活性可能降解引物，所以應后把pfu 酶到反應體系中，并立即進行 PCR 反應。 2、pfu 酶的熱穩(wěn)定性比 Taq 酶好，對于 GC 含量很高的模板，變性溫度可以提高到98℃，對 pfu 酶的活性無影響。 儲存條件：-20℃，有效期一年。 |
使用方法：本產(chǎn)品僅用于科研
注意：標本采集人員需按有關規(guī)定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內鼻腭處，停留片刻后緩慢轉動退出。以同一拭子拭兩側鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標本放入大小適合的塑料袋內密封；每袋裝一份標本。同時也將標本有關信息填在標本送檢表上，連同一級容器封于塑料袋內。
將裝標本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內，擰緊蓋，在容器上標明有關信息。同一患者2份以上的密封標本，可以放在同一個二級容器內。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力，內襯具吸水和緩沖能力的物質。所有容器必須印有生物危險標注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(或疫苗運輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質填充，并密封，由專人(2人)運送，不得郵寄，最好使用專車。
采集的標本若不能在24小時內送達，則應盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的，需在4℃冰箱短時間暫存，并盡快聯(lián)系遞送標本。流感病毒在-20℃～-40℃時不穩(wěn)定，故長期保存最好在-70℃溫度以下進行。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
酵母甘肽還原酶活性比色法定量檢測試劑盒
植物甘肽還原酶活性比色法定量檢測試劑盒
細胞甘肽合成酶活性比色法定量檢測試劑盒
組織甘肽合成酶活性比色法定量檢測試劑盒
植物甘肽合成酶活性比色法定量檢測試劑盒
兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)elisa 5'-Deoxy-5-fluorocytidine 中文名： 分子式：C9H12FN3O4
兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISAKit 5-Chlorothiophene-2-carboxylic acid 24065-33-6 中文名： 分子式：C5H3ClO2S 度：98.0% 關鍵詞：
兔性血友病因子/瑞斯托輔因子(VWF)ELISAKit 6-Hydroxyrubiadin 中文名：6-羥基甲基異茜草素 分子式：C15H10O5 度：97.5%
兔性血友病因子(rabbit VWF) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進口分裝 5-Chloro-2-nitrobenzoic acid 中文名： 分子式：C7H4ClNO4 度：98.0%
兔細胞粘附分子-1(rabbit VCAM-1) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進口分裝 5-Chloro-4-methoxy-2-oxo-1,2-dihydropyridine-3-carbonitrile 147619-40-7 中文名： 分子式：C7H5ClN2O2 度：98.0% 關鍵詞：
高保真平末端pfu DNA聚合酶二甲基亞砜(Standard for GC,≥99.95%(GC)) Dimethyl sulfoxide 質量規(guī)格：Standard for GC,≥99.95%(GC) Mouserudimealbovineserumalbumincheck-upelisa小鼠的牛血清白蛋白殘留檢測elisa規(guī)格：96T/48T
正癸醇(Standard for GC,≥99.5%(GC)) n-Decyl alcohol 質量規(guī)格：Standard for GC,≥99.5%(GC) 小鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)elisa ，英文名： G-CSF ELISA Kit
琥珀酸二乙酯(standard for GC,≥99.6%(GC)) Diethyl succinate 質量規(guī)格：standard for GC,≥99.6%(GC) 大鼠環(huán)0酸腺苷(cAMP)ELISA檢測試劑盒Ratcyclicadenosinemonophosphate,cAMPELISAKit 96T/48T
癸二酸二乙酯(Standard for GC, ≥99.5% (GC)) Diethyl sebacate 質量規(guī)格：Standard for GC, ≥99.5% (GC) 人低密度脂蛋白受體相關蛋白4(LRP-4)抗體(IgG)試劑盒 Human LRP-4 IgG ELISA Kit
二十二烷(standard for GC,≥99.0%(GC)) Docosane 質量規(guī)格：standard for GC,≥99.0%(GC) RatN-terminalpro-brainnaiureticpeptide,-proBNPELISAKit大鼠N端前腦素(-proBNP)elisa規(guī)格：96T/48T
三十二烷(standard for GC,≥98.0%(GC)) Dotriacontane 質量規(guī)格：standard for GC,≥98.0%(GC) FAM蛋白標記試劑盒3(200微克/)
正庚醇(Standard for GC,>99.5%(GC)) 1-Heptanol 質量規(guī)格：Standard for GC,>99.5%(GC) MousesecretoryimmunoglobulinA,sIgAelisa小鼠分泌型球蛋白A(sIgA)elisa規(guī)格：96T/48T
γ -丁內酯（GBL）(standard for GC,≥99.9%(GC)) 4-Hydroxybutanoic acid lactone 質量規(guī)格：standard for GC,≥99.9%(GC) 小鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA 試劑盒
丙位庚內酯(Standard for GC ,>98.5%(GC)) γ-Heptalactone 質量規(guī)格：Standard for GC ,>98.5%(GC) Rat ciliary neuroophic factor (CF) ELISA Kit 大鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CF)elisa
(+)-葑酮(standard for GC, ≥99.5% (GC)) (+)-Fenchone 質量規(guī)格：standard for GC, ≥99.5% (GC) Humanneuophilgelatinase-associatedlipocalin,NGALELISAKit 人中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)elisa 96T/48T 進口分裝
生物醫(yī)學實驗中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養(yǎng)基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細小，傳統(tǒng)的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點，本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。
