上海邦景實業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品: 進口elisa試劑盒,細胞株,細胞系,菌種 |
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更新時間:2022-06-07 09:48:05瀏覽次數(shù):249
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中文名稱:熱啟動DNA聚合酶
英文名稱:Hot Start DNA Polymerase
產(chǎn)品規(guī)格:250U
發(fā)貨周期:1~3天
產(chǎn)品貨號:BJ-F0164040
生物醫(yī)學實驗中,常常需要從液體樣品(如血漿,培養(yǎng)基)中純化病毒,但由于病毒顆粒十分細小,傳統(tǒng)的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來,此操作非常繁瑣,并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點,本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。產(chǎn)品介紹:
Hot Start DNA Polymerase(HS DNA Polymerase)是經(jīng)過化學修飾的熱穩(wěn)定重組型Taq DNA Polymerase,在室溫下活性被*封閉,只有經(jīng)過95℃加熱后活性才被釋放,可防止在樣品準備及反應(yīng)升溫階段產(chǎn)生非特異擴增和引物二聚體。與基于抗體的熱啟動Taq酶相比,化學修飾的Hot Start DNA Polymerase活性封閉更*,嚴謹性更高;與現(xiàn)有化學修飾的熱啟動Taq酶相比,Hot Start DNA Polymerase的激活時間只需要5分鐘,兼容現(xiàn)有的PCR程序。 Hot Start DNA Polymerase的反應(yīng)緩沖液中的組分、濃度都經(jīng)過優(yōu)化,使得引物與模板結(jié)合的嚴謹性提高,從而大程度的減少非特異擴增和引物二聚體,非常適合于從復(fù)雜模板(基因組,cDNA)中擴增低拷貝基因。PCR產(chǎn)物3’端帶A,可克隆至T載體。另外,產(chǎn)品中提供的PCR Enhancer可有助于高GC含量片段的擴增。 引物設(shè)計注意事項 1)引物3’端后一個堿基好為G或者C; 2)引物3’端后8個堿基應(yīng)避免出現(xiàn)連續(xù)錯配; 3)引物3’端盡量避免發(fā)夾結(jié)構(gòu)出現(xiàn); 4)引物的Tm值調(diào)整至55℃-65℃之間。 5)引物額外附加序列,即與模板非配對序列,不應(yīng)參與引物Tm值計算; 6)引物的GC含量控制在40%-60%之間; 7)正向引物和反向引物Tm值以及GC含量盡可能一致。 |
使用方法:本產(chǎn)品僅用于科研
注意:標本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集:將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處,停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集:用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁,將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封;每袋裝一份標本。同時也將標本有關(guān)信息填在標本送檢表上,連同一級容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內(nèi),擰緊蓋,在容器上標明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標本,可以放在同一個二級容器內(nèi)。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力,內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險標注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(nèi)(或疫苗運輸箱),放入冰排,然后以柔軟物質(zhì)填充,并密封,由專人(2人)運送,不得郵寄,最好使用專車。
采集的標本若不能在24小時內(nèi)送達,則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的,需在4℃冰箱短時間暫存,并盡快聯(lián)系遞送標本。流感病毒在-20℃~-40℃時不穩(wěn)定,故長期保存最好在-70℃溫度以下進行。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
精漿果糖含量比色法定量檢測試劑盒
精漿中性α-糖苷酶(α-glucosidase)活性比色法定量檢測試劑盒
細胞氧化應(yīng)激活性氧(ROS)魯米諾化學發(fā)光法
精液組分氧化應(yīng)激活性氧(ROS)魯米諾化學發(fā)光法
細胞氧化應(yīng)激活性氧(ROS)光澤精化學發(fā)光法
小鼠P450(mouse Cytochrome P450) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 Marsdenoside F 中文名: 分子式:C39H60O14 度:%
小鼠elisa 小鼠試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠試劑盒、小鼠eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Mannitol 中分子式:C6H14O6 度:98.5%
小鼠(mouse Cytochrome C) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 Ethyl chlorogenate 425408-42-0 中文名:綠原酸乙酯 分子式:C18H22O9
小鼠(Cyt-C)elisa Mebendazole 中文名: 分子式:C16H13N3O3
小鼠(Cyt-C)ELISAKit N-[Bis(methylthio)methylene]- p-sulfonamide 2651-15-2 中文名:N-[雙(甲硫基)亞甲基]對甲苯磺酰胺 分子式:C10H13NO2S3
熱啟動DNA聚合酶醋酸 HPLC≥97% 100mg 人基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP-12)試劑盒 Human Maix Metalloproteinase 12,MMP-12 ELISA Kit
HPLC≥98% 100mg Ratcholesterolesteransferprotein,CETPELISAKit大鼠酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)elisa規(guī)格:96T/48T
吡酸 HPLC≥98% 50mg 10倍PCB濃縮緩沖溶液100毫升
HPLC≥98% 100mg Mousecholinephosphoglyceride,PC/CPGelisa小鼠0酸甘油酯(PC/CPG)elisa規(guī)格:96T/48T
HPLC≥98% 100mg 小鼠血紅素氧合酶2(HO-2)elisa ,英文名: HO-2 ELISA Kit
,',三羥基異黃酮 HPLC≥98% 10mg 小鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA檢測試劑盒MouseHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgGELISAKit 96T/48T
卡托普 HPLC≥98% 100mg 人基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)試劑盒 Human Maix metalloproteinase 10,MMP-10 ELISA kit
β丁香烯 HPLC≥98% 0.1ml Ratcholesterol,CHELISAKit大鼠(CH)elisa規(guī)格:96T/48T
麥芽五糖 HPLC≥95% 100mg 10倍PCP濃縮緩沖溶液100毫升
泰妙菌素 HPLC≥98% 100mg Mousecholinephosphoglyceride,PC/CPGelisa小鼠0酸甘油酯(PC/CPG)elisa規(guī)格:96T/48T