上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: 進(jìn)口elisa試劑盒,細(xì)胞株,細(xì)胞系,菌種 |
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- www.bhsy-e.com/
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更新時(shí)間:2022-06-06 11:58:26瀏覽次數(shù):152
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操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。
中文名稱:長(zhǎng)片段DNA超速PCR MasterMix
英文名稱:Fast & Long DNA PCR MasterMix
產(chǎn)品規(guī)格:1ml|5ml
發(fā)貨周期:1~3天
產(chǎn)品貨號(hào):BJ-F0164024
生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中,常常需要從液體樣品(如血漿,培養(yǎng)基)中純化病毒,但由于病毒顆粒十分細(xì)小,傳統(tǒng)的分離方法是使用長(zhǎng)時(shí)間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來(lái),此操作非常繁瑣,并且病毒在此過(guò)程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn),本公司開(kāi)發(fā)了本產(chǎn)品。
產(chǎn)品介紹:
本品包含速長(zhǎng)片段DNA聚合酶、dNTPs和優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液,濃度為2×。使用時(shí)只需加入模板、引物,并補(bǔ)足水至Mix終濃度為1×即可。本制品含紅色示蹤染料,不需添加上樣緩沖液即可直接上樣進(jìn)行電泳;也可經(jīng)過(guò)純化處理,以用于酶切、連接、熒光測(cè)序等后續(xù)操作。 產(chǎn)品特點(diǎn): 1.快的擴(kuò)增速度:延伸速度可以達(dá)到5~10秒/kb,短半小時(shí)完成PCR。 2.突出的長(zhǎng)片段擴(kuò)增能力:可以擴(kuò)增高達(dá)10kb的長(zhǎng)片段(包括人類基因組此類的復(fù)雜模板)。 3.良好保真性:保真度是taq的3~6倍以上。 4.大擴(kuò)增能力:產(chǎn)量高,對(duì)于一些有特殊結(jié)構(gòu)的復(fù)雜模板和GC含量高模板有良好效果。 注意事項(xiàng): 1.本系統(tǒng)擴(kuò)增速度極快,短片段或者簡(jiǎn)單模板如質(zhì)粒模板可以嘗試5秒/kb延伸速度并采用較少循環(huán)數(shù)以進(jìn)一步縮短PCR時(shí)間。長(zhǎng)片段(≥3kb)或者復(fù)雜模板產(chǎn)量較低可以采用15-20秒/kb延伸速度或者采用較多循環(huán)數(shù)。 2.本品產(chǎn)量較低時(shí)可嘗試采用較長(zhǎng)的延伸時(shí)間(如20秒/kb)和循環(huán)數(shù)(如35個(gè))可以提高PCR產(chǎn)物的產(chǎn)量。 3.對(duì)于GC含量很高的模板,短片段預(yù)變性和變性溫度可以提高到98℃和/或適當(dāng)延長(zhǎng)變性時(shí)間。長(zhǎng)片段為了避免DNA損傷不應(yīng)該提高變性溫度,應(yīng)該適當(dāng)延長(zhǎng)預(yù)變性時(shí)間到5分鐘,變性時(shí)間可以適當(dāng)提高5-10秒。 4.如果擴(kuò)增模板GC含量高或者模板復(fù)雜擴(kuò)增效果不佳時(shí),可在反應(yīng)混合物中加入DMSO到終濃度1%-8%,按照1%梯度增加摸索佳濃度?;蛘呒尤胩鸩藟A至終濃度1~1.7M。并采用降落PCR(Touchdown PCR) 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年。 |
使用方法:本產(chǎn)品僅用于科研
注意:標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個(gè)人防護(hù)。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級(jí)容器)。
鼻拭子的采集:將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處,停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集:用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁,將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
直接在一級(jí)容器上用油性記號(hào)筆寫(xiě)明樣本的種類、采樣時(shí)間、編號(hào)、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封;每袋裝一份標(biāo)本。同時(shí)也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上,連同一級(jí)容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級(jí)容器)內(nèi),擰緊蓋,在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本,可以放在同一個(gè)二級(jí)容器內(nèi)。二級(jí)容器要承受不少于95 KPa的壓力,內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險(xiǎn)標(biāo)注。
將二級(jí)容器擺放在專用運(yùn)輸箱內(nèi)(或疫苗運(yùn)輸箱),放入冰排,然后以柔軟物質(zhì)填充,并密封,由專人(2人)運(yùn)送,不得郵寄,最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時(shí)內(nèi)送達(dá),則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無(wú)-70℃條件的,需在4℃冰箱短時(shí)間暫存,并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃~-40℃時(shí)不穩(wěn)定,故長(zhǎng)期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。
裂解液VII:細(xì)菌裂解溶液
裂解液VIII:細(xì)菌活性化蛋白制備溶液
細(xì)菌-抑制劑混合溶液
可溶性細(xì)菌膜蛋白制備試劑盒
電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)菌制備試劑盒
Rabbitalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)elisa規(guī)格:96T/48T 2-[(Acetylthio)methyl]-phenylpropionic acid 中文名: 分子式:C12H14O3S
Rabbitai-Monocyteaibody,AMAELISAKit兔抗單核細(xì)胞抗體(AMA)elisa規(guī)格:96T/48T 2-Amino-5-nitrobenzophenone 中文名:2-氨基-5-硝基二苯甲酮 分子式:C13H10N2O3
Rabbitai-glycoproteinaibody,GPELISAKit兔抗糖蛋白抗體(GP)elisa規(guī)格:96T/48T 2-Amino-4-methylbenzothiazole 1477-42-5 中文名:2-氨基-4-并噻唑 分子式:C8H8N2S
Rabbitai-braiissueaibody,ABAbELISAKit兔抗腦組織抗體(ABAb)elisa規(guī)格:96T/48T 2-Amino-3-methylbenzoic acid 4389-45-1 中文名:2-氨基-3-甲酸 分子式:C8H9NO2
rabbitadrencocoicoopichormone,ACTHELISAKit兔子促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)elisa規(guī)格:96T/48T 2-[(6-Chloro-3,4-dihydro-3-methyl-2,4-dioxo-1(2H)-pyrimidinyl)methyl]benzonitrile 865758-96-9 中文名: 分子式:C13H10ClN3O2
長(zhǎng)片段DNA超速PCR MasterMix二氯酞菁錫(IV) Tin(IV) Phthalocyanine Dichloride 質(zhì)量規(guī)格: 英文名稱RatPaRathyroidHormone-LikeRelatedProteinELISAKit大鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)規(guī)格:96T/48T
酞菁鎂(II) Magnesium(II) Phthalocyanine 質(zhì)量規(guī)格: 酵母過(guò)氧化物酶(GSHPX)活性酶動(dòng)力比色法定量檢測(cè)試劑盒20
酞菁錫(II) Tin(II) Phthalocyanine 質(zhì)量規(guī)格: ELISAKitHOXB2人同源框B2規(guī)格:48T/96T
酞菁二鋰(>93.0%(N)) Dilithium Phthalocyanine 質(zhì)量規(guī)格:>93.0%(N) 小鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF1α)elisa ,英文名: HIF1α ELISA Kit
4-氨基鄰苯二甲腈(>98.0%(N)) 4-Aminophthalonitrile 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(N) 人α橫紋肌肌動(dòng)蛋白(α-SCA)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanα-sarcomericactin,α-SCAELISAKit 96T/48T
4-叔丁基鄰苯二甲腈(>98.0%(GC)(N)) 4-tert-Butylphthalonitrile 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(N) 大鼠凝聚素(CLU)試劑盒 Rat Clusterin,CLU ELISA Kit
4-丁氧基鄰苯二甲腈(>95.0%(GC)) 4-Butoxyphthalonitrile 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 英文名稱RatPaRathyroidHormone-LikeRelatedProteinELISAKit大鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)規(guī)格:96T/48T
1,3-二亞氨基異吲哚啉(>98.0%(T)) 1,3-Diiminoisoindoline 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T) 酵母還原酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20
4,5-二氯鄰苯二甲腈(>98.0%(GC)(N)) 4,5-Dichlorophthalonitrile 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(N) ELISAKitGTC人通用轉(zhuǎn)錄復(fù)合體規(guī)格:48T/96T
4-十二烷氧基鄰苯二甲腈(>99.0%(GC)) 4-Dodecyloxyphthalonitrile 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) 小鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)elisa ,英文名: HIF-1α ELISA Kit
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。