上海邦景實業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品: 進口elisa試劑盒,細(xì)胞株,細(xì)胞系,菌種 |
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更新時間:2022-08-17 16:34:43瀏覽次數(shù):244
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操作流程:
1待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
2酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
3洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍將洗滌液注滿板孔后,即甩去,之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
4陰性對照孔每孔加入pbs 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人aif抗體工作液50μl。
5酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
6洗板,同4。
7每孔加1:5000稀釋的hrp-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
8酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
9洗板,同4。
10每孔加tmb顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
11每孔加100μl 2mol/l h2so4終止反應(yīng)。
12分別測450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2,終測得的od值為兩者之差w1-w2,以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
13數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本s和陰性對照n的 od值后,計算s/n值。s/n≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
IL-1豬白介素1檢測試劑盒 | IL-1 ELISA Kit | 48T/96T | BJ-E0284 |
試劑盒組成及試劑配制:
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),我司嚴(yán)格按照進行,已獲得國家承認(rèn)的“三證",每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的批號,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必?fù)?dān)心會有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,再進行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風(fēng)濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風(fēng)濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時,可用加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解。
ELISA 試驗時,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法"(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。
Ranolazine di 中文名:鹽酸雷諾嗪 分子式:C24H35Cl2N3O4 度:98.0% 血清總(TC)含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
Cilnidipine 中文名: 分子式:C27H28N2O7 度:98.0% 纖維蛋白原 (Fibrinogen) 作用: 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
Gefitinib 中文名: 分子式:C22H24ClFN4O3 度:98.0% 人 Foxp3(Foxp3) 作用: 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
Erlotinib 中文名:埃羅替尼 分子式:C22H23N3O4 度:98.0% 半乳糖凝集素 7 ( Galectin-7 ) 作用: 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
2-Flurbiprofen 中文名: 分子式:C15H13FO2 度:98.0% 胃泌素 (Gasin) 作用: 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
1-蒽(>97.0%(GC)) 1-Bromoanthracene 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 大鼠αS轉(zhuǎn)移酶(α-GST)檢測試劑盒Ratα-glathioneS-ansferases,α-GST
2-蒽(>97.0%(GC)) 2-Bromoanthracene 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 人白介素18結(jié)合蛋白(IL-18BP)試劑盒 Human IL-18BP
9,10-雙(二乙基膦甲基)蒽(>98.0%(GC)) 9,10-Bis(diethylphosphonomethyl)anthracene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 英文名稱MouseapoB100小鼠載脂蛋白B100(apoB100)
9-蒽(>99.0%(GC)(HPLC)) 9-Bromoanthracene 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)(HPLC) PH8-9顯色(THYMOLBLUE)指示溶液50毫升
2--9,10-二苯基蒽(>95.0%(GC)) 2-Bromo-9,10-diphenylanthracene 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) PorcineVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1試劑盒豬血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)試劑盒
9--10-苯基蒽(>98.0%(GC)) 9-Bromo-10-phenylanthracene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 小鼠端粒酶關(guān)聯(lián)蛋白1(TEP1)試劑盒 ,英文名: TEP1
2-氯蒽(>98.0%(GC)) 2-Chloroanthracene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 人乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白(HBXIP)檢測試劑盒HumanhepatitisBvirusXieractingprotein,HBXIP
9,10-二氯蒽(>96.0%(GC)) 9,10-Dichloroanthracene 質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC) 大鼠牛血清白蛋白(BSA)抗體(IgG)試劑盒 Rat bovine serum albumin(BSA)aibody IgG
1,5-二蒽(>97.0%(GC)) 1,5-Dibromoanthracene 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 英文名稱Ratcalcitoningenerelatedpeptide大鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)試劑盒
1,8-二蒽(>98.0%(GC)) 1,8-Diiodoanthracene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 酵母β-內(nèi)酰胺酶報告基因活性生物發(fā)光法定量檢測試劑盒20
小鼠中性粒細(xì)胞彈性(NE)elisa檢測試劑盒
IL-1豬白介素1檢測試劑盒雙特異性絲裂原活化蛋白5(MAP2K5)elisa檢測試劑盒免費代測
雙特異性絲裂原活化蛋白5(MAP2K5)elisa分析檢測試劑盒
雙試劑直接法酶標(biāo)儀及生化分析儀 25ml
雙試劑直接法分光光度計 100ml
雙酚A(BPA)elisa檢測試劑盒
注:本公司提供試劑盒免費代測服務(wù)。需要其他Elisa試劑盒請咨詢銷售人員。產(chǎn)品僅用于科研