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標記抗體的原理：
目前較為常用的標記抗體的方法，FITC一般呈黃色、褐色或褐黃色粉末或結晶，性質(zhì)穩(wěn)定在低溫中能保存數(shù)年。在堿性條件下，FITC的碳酰胺鍵可與抗體蛋白上的賴氨酸氨基共價結合，形成FITC-蛋白質(zhì)結合物，即熒光抗體或熒光結合物。一個抗體分子上最多能標記15~20個FITC分子，被標記的抗體仍能保持與相應抗原結合的能力，在熒光燈源紫外線或藍紫光激發(fā)下產(chǎn)生黃綠色熒光，通過熒光顯微鏡進行觀察或利用流式細胞儀分析，從而對抗原進行定性、定位或定量。 

抗體的種類：
抗體是在抗原刺激下產(chǎn)生的，體液性抗體由B淋巴細胞系產(chǎn)生。根據(jù)其化學結構和抗原的不同可分為IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5種類型.目前對免疫球蛋白G、A、M、E了解較多，對D的功能了解較少。
（1） IgG：是血清中濃度的一類球蛋白，約占免疫球蛋白含量的70～80%，50%分布于血漿。機體受到抗原初次刺激后，其產(chǎn)生時間僅次于IgM。在抗體介導的抗感染免疫中起主要作用。IgG是球蛋白單體，分子量16萬～18萬，可以通過兔的胎盤，但不能通過豬和牛的胎盤。在體內(nèi)可以有效地抵抗細菌、病毒等微生物侵襲。在體外的血清學反應中，參與沉淀反應、凝集反應、補體結合反應和中和反應。
（2） IgM：由5個球蛋白單位組成的五聚體，在血清中的含量僅次于IgG，分子量90萬，是體內(nèi)的球蛋白?？乖醮未碳C體后，IgM出現(xiàn)最早,在血清中的含量僅次于IgG，主要分布在血管內(nèi)，可以通過激活補體發(fā)揮溶菌、溶細胞及中和病毒的作用。因其是五聚體，免疫作用很強，是IgG的100倍，但由于含量僅為IgG的1/10，且持續(xù)時間短，所以在抗感染免疫中不能起主要作用。在體外的血清學反應中，參與凝集反應和補體結合反應。
（3） IgA：有單體和雙體兩種形式。單體存在于血清中，分子量約為17萬，亦稱為血清型IgA，有抗菌和抗病毒作用。雙體主要存在于外分泌液中，如唾液、淚液、初乳、氣管分泌液，以初乳中的含量。雙體IgA亦稱為分泌型IgA，由存在于粘膜和組織上的漿細胞產(chǎn)生，分子量40萬，含量較單體高6～８倍，是粘膜的重要防御因素，可以阻止細菌或病毒吸附于粘膜表面。
（4） IgE：是一種特殊的糖蛋白，為單位體結構，分子量19萬，由消化道、呼吸道粘膜固有層及局部淋巴結中的漿細胞所形成，在血清中含量甚微，是一種致敏抗體，容易吸附在細菌表面，當與相應抗原結合所引起過敏反應。在機體抵抗細菌和病毒的感染中幾乎無作用。多克隆抗體制備過程：
蛋白抗原
               ↘抗原準備→兔、小鼠免疫→抗血清→抗體純化  →鑒定（ELISA、WB、IHC）
多肽偶聯(lián)  ↗                                                 （抗原親和純化）
從細胞中提取出來的生物大分子是不純凈的，必須進一步分離純化才能獲得純品。在生物大分子制備工作中，分離純化是比較復雜和重要的一個環(huán)節(jié)。對于異類的物質(zhì)，如提純蛋白質(zhì)和酶時混雜著核酸，提純核酸時混雜著蛋白質(zhì)或多糖，一般可用專一性酶水解、有機溶劑抽提、選擇性分部沉淀等方法處理，小分子物質(zhì)常在整個制備過程中多次液相與固相互相轉(zhuǎn)化被分離或用透析方法除去。而對同類物質(zhì)，如酶和雜蛋白，RNA和DNA以及不同結構的蛋白質(zhì)、酶、核酸之間的分離，情況則復雜得多，主要應用的方法有電泳法、超速離心法、鹽析法、有機溶劑沉淀法、吸附法、結晶法、電點沉淀法、柱層析法
抗原抗體反應影響因素：
（一）反應物自身的因素
5） 抗體：不同來源的抗體,反應性各有差異,抗體的濃度、特異性和親和力都影響抗體抗原反應,為提高試驗的可靠性,應選擇高特異性、高親和力的抗體作診斷試劑.等價帶的寬窄也影響抗原抗體復合物的形成,單克隆抗體不適用于沉淀反應.
6）  抗原：抗原的理化性狀、分子量、抗原決定簇的種類及數(shù)目均可影響反應結果.顆粒性抗原出現(xiàn)凝集反應,可溶性抗原出現(xiàn)沉淀反應,單價抗原與相應抗體結合不出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象.
（二）反應環(huán)境條件
7） 酸堿度：抗原抗體反應必須在合適的pH環(huán)境中進行.蛋白質(zhì)具有兩性電離性質(zhì),因此每種蛋白質(zhì)都有固定的等電點.抗原抗體反應一般在pH6～9進行,有補體參與的反應pH為7.7.4,pH過高或過低都將影響抗原與抗體反應.
8）  溫度：在一定范圍內(nèi),溫度升高可加速分子運動,抗原與抗體碰撞機會增多,使反應加速.一般為15℃～40℃,常用的抗原抗體反應溫度為37℃,溫度如高于56℃,可導致已結合的抗原抗體再解離,甚至變性或破壞.每種試驗都有其*的最適反應溫度要求.此外,適當振蕩也可促進抗原抗體分子的接觸,加速反應.
9）  電解質(zhì)：抗原與抗體發(fā)生特異性結合后,雖由親水膠體變?yōu)槭杷z體,若溶液中無電解質(zhì)參加,仍不出現(xiàn)可見反應.為了促成沉淀物或凝集物的形成,常用0.85%NaCl或各種緩沖液作為抗原及抗體的稀釋液.

HeLa 229 細胞5-FAM, SE；5-羧基熒光素琥珀酯質(zhì)量規(guī)格：0.95-Carboxyfluorescein N-succinimidyl ester

EA.hy926臍靜脈細胞融合細胞 EA.hy926 human umbilical vein cell fusion cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS5,6-FAM；5(6)-羧基熒光素質(zhì)量規(guī)格：0.955(6)-Carboxyfluorescein

TNFSF9 Protein Mouse 重組小鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 蛋白 (His 標簽)5(6)-FAM, SE; 5(6)-羧基熒光素琥珀酯質(zhì)量規(guī)格：>90%5(6)-FAM, SE

大鼠條紋神經(jīng)元(RNs)(1×106) C6, 大鼠腦膠質(zhì)瘤細胞 RattusS-腺苷-L-蛋氨酸;S-腺苷質(zhì)量規(guī)格：BR,度>96%,干品腺苷蛋氨酸>49%S-adenosyl-L-mine (SAM)

羊膜細胞;WISH5(6)-ROX ;5(6)-羧基-X-羅丹明鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：>95%,進分5(6)-Carboxy-X- rhodamine; 5(6)-ROX
PDGFC Others Mouse 小鼠 PDGF-C / SCDGF 細胞裂解液 (陽性對照) 四扶硼鈉，英文名或英文縮寫：wo7ium fluoroborate，級別：AR，99.5%，規(guī)格：250毫克

MX-1 癌細胞碳醋鈷,減式(碳醋鈷) Cobclt ccronctq 213-79-1

SW 1353軟骨肉瘤細胞 SW 1353 in human chondrosarcoma cells L-15培養(yǎng)基+10%FBSTBSWITHNONFATMILK,BLOCKINGBUFFERBLEND,POWDERTBS 含脫脂奶粉, 粉末包蛋白組學級米白色粉末RTsigma

DKK1 Protein Rhesus 重組恒河猴 DKK-1 / Dkk1 蛋白 (256 Asn/Gln, His 標簽)食鹽，英文名或英文縮寫：wo7ium chloride，級別：超，99%，規(guī)格：50毫克

羊膜細胞;HA 血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL(卵清蛋白
ACCSL蛋白抗體說明敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21去甲基氯化西酞普蘭鹽酸鹽Demethylchloro Citalopram 質(zhì)量規(guī)格：美國進口

FCN1 Others Human  Ficolin-1 / Ficolin-A / FCN1 細胞裂解液 (陽性對照) 3-氧西酞普蘭3-Oxo Citalopram質(zhì)量規(guī)格：美國進口

神經(jīng)元細胞Many types of cells包裝：5 ×105方(1ml)(R)-草酸西酞普蘭(R)-Citalopram Oxalate質(zhì)量規(guī)格：美國進口

NA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Aichi/2/1968) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 細胞裂解液 (陽性對照) 西酞普蘭N-氧化物Citalopram N-Oxide質(zhì)量規(guī)格：美國進口

雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7B5(S)-西酞普蘭N-氧化物(S)-Citalopram N-Oxide質(zhì)量規(guī)格：美國進口
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