上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: 進(jìn)口elisa試劑盒,細(xì)胞株,細(xì)胞系,菌種 |
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更新時(shí)間:2022-06-13 14:06:02瀏覽次數(shù):219
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生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中,常常需要從液體樣品(如血漿,培養(yǎng)基)中純化病毒,但由于病毒顆粒十分細(xì)小,傳統(tǒng)的分離方法是使用長(zhǎng)時(shí)間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來(lái),此操作非常繁瑣,并且病毒在此過(guò)程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn),本公司開(kāi)發(fā)了本產(chǎn)品。
中文名稱:Y2HGold酵母感受態(tài)細(xì)胞
英文名稱:Y2HGold Chemically Competent Cell
產(chǎn)品規(guī)格:10×100μl|50×100μl
發(fā)貨周期:1~3天
產(chǎn)品貨號(hào):BJ-F0164669
產(chǎn)品介紹:
Y2HGold菌株是GAL4系統(tǒng)酵母雙雜實(shí)驗(yàn)用菌株,MATa型,可直接轉(zhuǎn)化質(zhì)粒或與MATα型酵母菌株Y187通過(guò)mating操作進(jìn)行蛋白互作驗(yàn)證或篩庫(kù)試驗(yàn)。 Transformation marker為:trp1,leu2,報(bào)告基因?yàn)椋?/span>AbAr,HIS3,ADE2,MEL1。 Y2HGold-GAL4酵母雙雜系統(tǒng)需要兩種質(zhì)粒配套使用:PGBKT7和PGADT7。 質(zhì)粒PGBKT7的篩選標(biāo)志為TRP1,用于表達(dá)DNA-BD(來(lái)自酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4N端1~ 174位氨基酸)與目標(biāo)蛋白(Bait)的融合蛋白;質(zhì)粒PGADT7的篩選標(biāo)志為LEU,用于表達(dá)AD(GAL4 C端768 ~881位氨基酸)與目標(biāo)蛋白(Prey)的融合蛋白。 GAL4系統(tǒng)原理:一個(gè)完整的酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4可分為功能上相互獨(dú)立的兩個(gè)結(jié)構(gòu)域:位于N端1 ~174位氨基酸區(qū)段的DNA結(jié)合域(DNA-BD)和位于C端768 ~881位氨基酸區(qū)段的轉(zhuǎn)錄激活域(AD)。 DNA-BD能夠識(shí)別GAL4-responsive gene的上游激活序列UAS,并與之結(jié)合。 而AD可以啟動(dòng)UAS下游的基因進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。BD和AD單獨(dú)存在不能激活轉(zhuǎn)錄,但當(dāng)二者接近時(shí),則呈現(xiàn)完整的GAL4活性,使含有UAS的啟動(dòng)子下游基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)。正常條件下,BD不與AD結(jié)合,將要檢測(cè)的蛋白質(zhì)分別與BD和AD融合,形成bait融合蛋白(bait-BD)和prey融合蛋白(prey-AD),如果bait和prey發(fā)生相互作用,就會(huì)促使BD和AD的相互接近,形成完整的GAL4,從而激活報(bào)告基因的轉(zhuǎn)錄。 Y2HGold有四個(gè)報(bào)告基因:AbAr,HIS3,ADE2,MEL1,分別由三種不同的啟動(dòng)子(G1,G2,M1)啟動(dòng),這三種啟動(dòng)子只有GAL4識(shí)別的17bp核心區(qū)相同,其余部分均不同,大大降低了酵母雙雜假陽(yáng)性發(fā)生的概率。此外新報(bào)告基因AbAr與以前的營(yíng)養(yǎng)缺陷報(bào)告基因相比具有更低背景的優(yōu)點(diǎn),也可以降低酵母雙雜假陽(yáng)性發(fā)生的概率。Y2HGold感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,-80℃可保存三個(gè)月,經(jīng)PGADT7質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>104cfu/μg DNA。 保存條件:-80℃ |
使用方法:本產(chǎn)品僅用于科研
注意:標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個(gè)人防護(hù)。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級(jí)容器)。
鼻拭子的采集:將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處,停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集:用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁,將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
直接在一級(jí)容器上用油性記號(hào)筆寫明樣本的種類、采樣時(shí)間、編號(hào)、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封;每袋裝一份標(biāo)本。同時(shí)也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上,連同一級(jí)容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級(jí)容器)內(nèi),擰緊蓋,在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本,可以放在同一個(gè)二級(jí)容器內(nèi)。二級(jí)容器要承受不少于95 KPa的壓力,內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險(xiǎn)標(biāo)注。
將二級(jí)容器擺放在專用運(yùn)輸箱內(nèi)(或疫苗運(yùn)輸箱),放入冰排,然后以柔軟物質(zhì)填充,并密封,由專人(2人)運(yùn)送,不得郵寄,最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時(shí)內(nèi)送達(dá),則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無(wú)-70℃條件的,需在4℃冰箱短時(shí)間暫存,并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃~-40℃時(shí)不穩(wěn)定,故長(zhǎng)期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
冰凍切片組織鈣ATP酶PMCA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
石蠟切片組織鈣ATP酶PMCA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞鈣ATP酶PMCA蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞鈣ATP酶PMCA蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒
鈣ATP酶PMCA蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)elisa ,英文名: VEGFR-1/Flt1 ELISA Kit
小鼠硫氧化還原蛋白(x)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseThioredoxin,xELISAKit 96T/48T
人肌直蛋白蛋白(DMPK)免疫試劑盒 Human Myotonin-protein kinase,DMPK ELISA kit
RatcoagulationfactorⅢ,FⅢELISAKit大鼠Ⅲ(FⅢ)elisa規(guī)格:96T/48T
10倍酵母菌SD-URA培養(yǎng)基100毫升
MouseCollagenaseIelisa小鼠膠原酶I(CollagenaseI)elisa規(guī)格:96T/48T
Y2HGold酵母感受態(tài)細(xì)胞小鼠乳腺癌易感蛋白2(BRCA2)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠乳腺癌標(biāo)志物-CA153elisa分析檢測(cè)試劑盒
小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)elisa分析檢測(cè)試劑盒
小鼠乳鐵傳遞蛋白(LTF)elisa檢測(cè)試劑盒
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。