上海邦景實業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品: 進(jìn)口elisa試劑盒,細(xì)胞株,細(xì)胞系,菌種 |
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更新時間:2022-06-13 14:16:00瀏覽次數(shù):288
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中文名稱:EHA105農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞
英文名稱:EHA105 Chemically Competent Cell
產(chǎn)品規(guī)格:10×100μl|50×100μl
發(fā)貨周期:1~3天
產(chǎn)品貨號:BJ-F0164677
生物醫(yī)學(xué)實驗中,常常需要從液體樣品(如血漿,培養(yǎng)基)中純化病毒,但由于病毒顆粒十分細(xì)小,傳統(tǒng)的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來,此操作非常繁瑣,并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點,本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。產(chǎn)品介紹:
EHA105菌株由EHA105菌株改造而來,為C58型背景,核基因中含有篩選標(biāo)簽——抗性基因rif,為了便于轉(zhuǎn)化操作,此菌株攜帶一無自身轉(zhuǎn)運(yùn)功能的琥珀堿型Ti質(zhì)粒pEHA105(pTiBo542DT-DNA),此質(zhì)粒含有vir基因(vir基因是T-DNA插入植物基因組必需的元件,pEHA105(pTiBo542DT-DNA)質(zhì)粒自身的T-DNA轉(zhuǎn)移功能被破壞,但可以幫助轉(zhuǎn)入的雙元載體T-DNA順轉(zhuǎn)移)。 pEHA105(pTiBo542DT-DNA)型Ti質(zhì)粒含有篩選標(biāo)簽:strep,賦予EHA105菌株鏈抗性,適用于水稻、煙草等植物的轉(zhuǎn)基因操作,經(jīng)pCAMBIA2301質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率可達(dá)104cfu/μg。 保存條件:-80℃ 基因型: C58(rif R)Ti pEHA105(pTiBo542DT-DNA)(strepR)Succinamopine 操作說明: 1.取-80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)于冰上待其部分融化,處于冰水混合狀態(tài)時插入冰中。 2.每100μl感受態(tài)加1μg(體積不大于10μl)質(zhì)粒DNA,用手管底混勻,依次于冰上靜置5分鐘、液氮5分鐘、28℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。 3.加入700μl無抗生素的LB或YEB液體培養(yǎng)基,于28℃振蕩培養(yǎng)2~3小時。 4.6000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天(當(dāng)平板只含有50μg/ml kan時,28℃培養(yǎng)48h即可;平板中同時加入50μg/ml kan,20μg/ml rif時,需28℃培養(yǎng)60h;如果使用的平板含有50μg/ml rif則需要28℃培養(yǎng)72-90h)。 注意事項: 1.感受態(tài)細(xì)胞好在冰上融化。 2.混入質(zhì)粒時應(yīng)輕柔操作。 3.轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)??上鄳?yīng)減少終用于涂板的菌量。 |
使用方法:本產(chǎn)品僅用于科研
注意:標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個人防護(hù)。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集:將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處,停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集:用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁,將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封;每袋裝一份標(biāo)本。同時也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上,連同一級容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內(nèi),擰緊蓋,在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本,可以放在同一個二級容器內(nèi)。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力,內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險標(biāo)注。
將二級容器擺放在專用運(yùn)輸箱內(nèi)(或疫苗運(yùn)輸箱),放入冰排,然后以柔軟物質(zhì)填充,并密封,由專人(2人)運(yùn)送,不得郵寄,最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時內(nèi)送達(dá),則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的,需在4℃冰箱短時間暫存,并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃~-40℃時不穩(wěn)定,故長期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
冰凍切片組織組蛋白熒光顯微鏡檢測試劑盒
石蠟切片組織組蛋白熒光顯微鏡檢測試劑盒
載玻片細(xì)胞組蛋白NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
冰凍切片組織組蛋白NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
石蠟切片組織組蛋白NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
苯并[g,h,i]芘(標(biāo)準(zhǔn)品) Benzo[ghi]perylene 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱核糖體、P抗體、IgG/M/A規(guī)格:96T/48T
1-十八烯(標(biāo)準(zhǔn)品) 1-Octadecene 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC) 副傷B(SalmonellaParatyphiB)標(biāo)準(zhǔn)曲線定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒2
辛胺(標(biāo)準(zhǔn)品) n-Octylamine 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC) ELISAKitLXA4人脂氧素A4規(guī)格:48T/96T
十八烷(標(biāo)準(zhǔn)品) Octadecane 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC) 小鼠0脂酰絲酸(PS)elisa ,英文名: PS ELISA Kit
2-辛酮(標(biāo)準(zhǔn)品) 2-Octanone 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC) 大鼠降鈣素(CT)ELISA檢測試劑盒RatCalcitonin,CTELISAKit 96T/48T
苯氧乙酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Phenoxyacetic acid 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 人丁型肝炎IgM(HDV IgM)試劑盒 Human Hepatitis D virus IgM,HDV IgM ELISA Kit
菲(標(biāo)準(zhǔn)品) Phenanthrene 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析 Ratmyeloperoxidase,MPOELISAKit大鼠髓過氧化物酶(MPO)elisa規(guī)格:96T/48T
芘(標(biāo)準(zhǔn)品) Pyrene 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 DOPAC高效液相色譜電化學(xué)定量檢測試劑盒20
(-)-鹽酸東莨菪堿(標(biāo)準(zhǔn)品) (?)-Scopolamine 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.0% mouseprolactin,PRLelisa小鼠催乳素(PRL)elisa規(guī)格:96T/48T
十四烷(標(biāo)準(zhǔn)品) Tetradecane 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC) 小鼠0脂酰肌醇特異性0酯酶Cβ1(PLCβ1)elisa ,英文名: PLCβ1 ELISA Kit
EHA105農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞Methimazole 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 小鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
枸櫞酸氯米芬 Clomiphene 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 小鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA檢測試劑盒MousesolubleP-selectin,sP-selectinELISAKit 96T/48T
甲磺酸雙氫毒堿 Dihydroergotoxine mesylate 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 小鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)elisa ,英文名: sP-selectin ELISA Kit
6-醛基異麥冬黃烷酮A 6-Aldehydoisoophiopogonanone A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)elisa ,英文名: sTLR2 ELISA Kit
Chlorprothixene 質(zhì)量規(guī)格:檢查 小鼠可溶性Toll樣受體4(sTLR4)elisa ,英文名: sTLR4 ELISA Kit
Chlorprothixene 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠可溶性Toll樣受體9(sTLR9/sCD289)elisa ,英文名: sTLR9/sCD289 ELISA Kit
咪唑 Imidazole 質(zhì)量規(guī)格:檢查 小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原30(sCD30)Elisa檢測試劑盒Mousesolubleclusterofdiffereiation30,sCD30ElisaKit 96T/48T
瑞他帕林;瑞他莫林 Retapamulin 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原30配體(sCD30L)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Lactulose 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(sCD40L)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
FTIBAMZONE 質(zhì)量規(guī)格:UV法含量測定 小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(sCD40L)ELISA檢測試劑盒MouseSolubleClusterofdiffereiation40ligand,sCD40LELISAKit 96T/48T