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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品： 進(jìn)口elisa試劑盒，細(xì)胞株，細(xì)胞系，菌種 |
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更新時(shí)間：2022-06-24 20:19:59瀏覽次數(shù)：327
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生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養(yǎng)基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細(xì)小，傳統(tǒng)的分離方法是使用長時(shí)間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn)，本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。
中文名稱：一步法熒光定量RT-PCR試劑盒(探針法)
英文名稱：ByFast One-Step Probe qRT-PCR Kit
產(chǎn)品規(guī)格：20μL×100T|20μL×500T
發(fā)貨周期：1～3天
產(chǎn)品貨號：BJ-F0164402
產(chǎn)品介紹：
試劑盒是一種基于TaqMan等探針的用于一步法反轉(zhuǎn)錄實(shí)時(shí)熒光定量PCR，主要用于RNA的特異性高靈敏度定量檢測。由于使用的探針一般是TaqMan探針，所以本方法也常稱作TaqMan探針法。 本試劑盒以提取的RNA為模版，使用qPCR引物在同一反應(yīng)管內(nèi)連續(xù)進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄和熒光定量PCR，操作簡單快速，大限度地減少人為誤差，有效降低污染風(fēng)險(xiǎn)，節(jié)約PCR實(shí)驗(yàn)的操作時(shí)間，檢測通量大。 本試劑盒整合了高效的BalbRT M-MuLV Reverse Transcriptase、RNase Inhibitor和優(yōu)異的抗體結(jié)合型熱啟動ByFast Taq DNA Polymerase，并優(yōu)化了緩沖體系，反轉(zhuǎn)錄性能優(yōu)、檢測靈敏度高、擴(kuò)增特異性、反應(yīng)穩(wěn)定性好，非常適合于內(nèi)源低豐度RNA、外源病毒RNA等微量RNA的檢測。 檢測原理： 探針法qPCR不使用熒光染料如SYBR Green等對PCR產(chǎn)物進(jìn)行熒光染色，而是采用了熒光基團(tuán)和淬滅基團(tuán)(quencher)標(biāo)記的DNA探針靶向擬通過PCR檢測的目標(biāo)序列(設(shè)計(jì)的探針結(jié)合位點(diǎn)通常位于兩條引物結(jié)合位點(diǎn)之間)。正常情況下，探針上的淬滅基團(tuán)由于空間上的熒光共振能力轉(zhuǎn)移(FRET)而導(dǎo)致熒光基團(tuán)淬滅。在PCR反應(yīng)擴(kuò)增目標(biāo)序列時(shí)，引物和探針都會退火到目標(biāo)基因上，隨著引物的延伸，Taq酶的5'→3'外切酶活性會導(dǎo)致結(jié)合在目標(biāo)序列上的探針從5’端開始逐漸被降解。探針的熒光基團(tuán)和淬滅基團(tuán)被Taq酶切開后，淬滅基團(tuán)的作用消失，熒光基團(tuán)就能正常地被激發(fā)光所激發(fā)而產(chǎn)生熒光了。每經(jīng)過一個(gè)PCR循環(huán)，就會有更多的熒光基團(tuán)被釋放，熒光度與新合成的目標(biāo)片段數(shù)量成正比，從而就可以實(shí)現(xiàn)定量檢測了。探針通常是目標(biāo)序列特異性的一段線性DNA，5'端標(biāo)記FAM或HEX等熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記BHQ1、TAMRA或MGB等熒光淬滅基團(tuán)。 保存：-20℃避光，盡量避免反復(fù)凍融，有效期2年。 |
使用方法：本產(chǎn)品僅用于科研
注意：標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個(gè)人防護(hù)。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時(shí)間、編號、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封；每袋裝一份標(biāo)本。同時(shí)也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上，連同一級容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內(nèi)，擰緊蓋，在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本，可以放在同一個(gè)二級容器內(nèi)。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力，內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險(xiǎn)標(biāo)注。
將二級容器擺放在專用運(yùn)輸箱內(nèi)(或疫苗運(yùn)輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質(zhì)填充，并密封，由專人(2人)運(yùn)送，不得郵寄，最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時(shí)內(nèi)送達(dá)，則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的，需在4℃冰箱短時(shí)間暫存，并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃～-40℃時(shí)不穩(wěn)定，故長期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
（Verhoeff-Van Gieson）染色試劑盒
冰凍切片彈性纖維（ELASTIC）偉郝夫范吉森
石蠟切片彈性纖維（ELASTIC）馬森（MASSON）染色試劑盒
冰凍切片彈性纖維（ELASTIC）馬森（MASSON）染色試劑盒
石蠟切片膠原纖維（MASSON）染色試劑盒
兔子細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 1-Benzyl-1H-indazol-3-ol 2215-63-6 中文名：1-芐基-1H-吲唑-3-醇 分子式：C14H12N2O 度：98.0%
兔子細(xì)胞間粘附分子1elisa 兔子細(xì)胞間粘附分子1試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 兔子細(xì)胞間粘附分子1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子細(xì)胞間粘附分子1試劑盒、兔子細(xì)胞間粘附分子1eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。 Abscisic acid 14375-45-2 中文名：脫落酸 分子式：C15H20O4
兔子細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)elisa Abscisic acid 中文名：脫落酸 分子式：C15H20O4
兔子細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISAKit 9,9-Bis(4-hydroxyphenyl)fluorene 中文名：9,9-雙(4-羥)芴 分子式：C25H18O2 度：98.0%
兔子細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 1-Benzyl D-aspartate 中文名：D-天冬1-芐酯 分子式：C11H13NO4 度：98.0%
一步法熒光定量RT-PCR試劑盒(探針法)加拉銨(>98%,BR) Gallamine triethiodide 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR ELISAKitTGF-α人轉(zhuǎn)化生長因子α規(guī)格：48T/96T
D-氨基葡萄糖硫酸鈉鹽 GlcN-2S, D-Glucosamine-2-sulfate salt 質(zhì)量規(guī)格：>96%,BR 小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)elisa ，英文名： BDNF ELISA Kit
葡萄糖-6-脫氫酶 Glucose-6-phosphate dehydrogenase 質(zhì)量規(guī)格：酶活：>200 NADP units/mg,BC 大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA檢測試劑盒RatCaveolin-1,Cav-1ELISAKIT 96T/48T
戊二酸(>98%,BR) Glutaric acid 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人兒茶酚胺(CA)試劑盒 Human catecholamine,CA ELISA Kit
戊二酸酐(>96%,BR) Glutaric anhydride 質(zhì)量規(guī)格：>96%,BR RatMannmabindingprotein/mannanbindinglectin,MBP/MBLELISAKit大鼠甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集素(MBP/MBL)elisa規(guī)格：96T/48T
三醋酸甘油酯(>98%,BR) Glycerol triacetate 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR DICER酶基因敲除試劑盒5
甘鈉(>98%,BR) Glycine salt 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR MousePeosidineelisa小鼠戊糖素(Peosidine)elisa規(guī)格：96T/48T
乙醇酸(>98%,BR) Glycolic acid 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA 試劑盒
硬脂酸單甘油酯(>98%,BR) GMS, glycerol monostearate 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR Rat thyroglobulin (TG) ELISA Kit 大鼠甲狀腺球蛋白(TG)elisa
氯化金 Gold (III) chloride tetrahydrate 質(zhì)量規(guī)格：BC HumanNeurokininsB,NKBELISAKit 人神經(jīng)激肽B(NKB)elisa 96T/48T 進(jìn)口分裝
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。
