上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品: 進(jìn)口elisa試劑盒,細(xì)胞株,細(xì)胞系,菌種 |
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更新時(shí)間:2022-06-10 10:19:26瀏覽次數(shù):90
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中文名稱:全血PCR增強(qiáng)液
英文名稱:2×Blood PCR Enhancer
產(chǎn)品規(guī)格:20μL×200T|20μL×1000T
發(fā)貨周期:1~3天
產(chǎn)品貨號(hào):BJ-F0164416
生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中,常常需要從液體樣品(如血漿,培養(yǎng)基)中純化病毒,但由于病毒顆粒十分細(xì)小,傳統(tǒng)的分離方法是使用長時(shí)間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來,此操作非常繁瑣,并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn),本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。產(chǎn)品介紹:
本制品是一種使用的BloodTaq DNA Polymerase (Blood-resistant,貨號(hào):YTB4081)或BloodTaq HF DNA Polymerase (Blood-resistant,貨號(hào):YTB4082)時(shí),克服因模板高GC含量所導(dǎo)致的PCR擴(kuò)增障礙的PCR增劑。高GC含量DNA片段的擴(kuò)增一直是分子生物學(xué)操作過程中的一個(gè)難點(diǎn),本產(chǎn)品可用于含有肝素、檸檬酸鈉以及EDTA等抗凝血的直接PCR反應(yīng),從而大大提高了高GC含量DNA模板的擴(kuò)增效率及擴(kuò)增的特異性。本產(chǎn)品也可以用于普通PCR時(shí)擴(kuò)增高GC含量的目的片段。 2×Blood PCR Enhancer可以適用于商業(yè)化的常見的多種耐血DNA聚合酶,如的BloodTaq DNA Polymerase (Blood-resistant,貨號(hào):YTB4081)和BloodTaq HF DNA Polymerase (Blood-resistant,貨號(hào):YTB4082),NEB的Hemo KlenTaq等。 保存:-20℃ 注意事項(xiàng): 在使用本產(chǎn)品2×Blood PCR Enhancer的同時(shí),必須同時(shí)使用和耐血DNA聚合酶配套的終濃度為1×的PCR Buffer。 本產(chǎn)品溶解時(shí)如果有結(jié)晶狀沉淀物,可以在50℃水浴溫育片刻促進(jìn)溶解,并確保*溶解后使用。 請(qǐng)盡量使用新近采集的抗凝血樣本進(jìn)行檢測(cè);如果是凍存的樣本,盡量避免反復(fù)凍融,以免在凍融過程中導(dǎo)致目的基因的斷裂和降解。 設(shè)置PCR反應(yīng)體系時(shí),抗凝血的推薦用量為PCR體系總體積的5~10%左右,可以直接添加到PCR體系中,無需進(jìn)行任何額外處理。 PCR反應(yīng)結(jié)束之后,建議3000~5000g離心3~5min以沉淀血細(xì)胞碎片,便于吸取上清用于電泳分析等。 注意:由于抗凝血本身的原因,PCR結(jié)束后在PCR管底部會(huì)出現(xiàn)透明凝膠狀物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象。 由于PCR反應(yīng)非常靈敏,可以擴(kuò)增目的基因序列過1000萬倍,在操作時(shí)請(qǐng)注意避免微量待擴(kuò)增DNA的污染,并盡量考慮設(shè)置不加模板的空白對(duì)照以確認(rèn)是否有待擴(kuò)增DNA的污染。 |
使用方法:本產(chǎn)品僅用于科研
注意:標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個(gè)人防護(hù)。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級(jí)容器)。
鼻拭子的采集:將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處,停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集:用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁,將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
直接在一級(jí)容器上用油性記號(hào)筆寫明樣本的種類、采樣時(shí)間、編號(hào)、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封;每袋裝一份標(biāo)本。同時(shí)也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上,連同一級(jí)容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級(jí)容器)內(nèi),擰緊蓋,在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本,可以放在同一個(gè)二級(jí)容器內(nèi)。二級(jí)容器要承受不少于95 KPa的壓力,內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險(xiǎn)標(biāo)注。
將二級(jí)容器擺放在專用運(yùn)輸箱內(nèi)(或疫苗運(yùn)輸箱),放入冰排,然后以柔軟物質(zhì)填充,并密封,由專人(2人)運(yùn)送,不得郵寄,最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時(shí)內(nèi)送達(dá),則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的,需在4℃冰箱短時(shí)間暫存,并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃~-40℃時(shí)不穩(wěn)定,故長期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。
通用型傷(Salmonella Typhi)定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒
組織傷(Salmonella Typhi)定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒
體液傷(Salmonella Typhi)定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒
糞便傷(Salmonella Typhi)定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒
環(huán)境傷(Salmonella Typhi)定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒
腐植酸,腐殖酸 Humic acid 質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR Rat8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdGELISAKit大鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)elisa規(guī)格:96T/48T
光萼野百合堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Usaramine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 載玻片細(xì)胞PAR-1蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
L-天門冬鈉鹽 L-Aspartic acid salt 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR MonkeyHyaluronicacid,HAelisa猴透明質(zhì)酸(HA)elisa規(guī)格:96T/48T
花旗松素,二氫槲皮素 Taxifolin 質(zhì)量規(guī)格:>98% 小鼠壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)elisa ,英文名: TNFsR-Ⅱ ELISA Kit
花旗松素,二氫槲皮素(標(biāo)準(zhǔn)品) Taxifolin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠(Cyt-C)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseCytochrome-C,Cyt-CELISAKit 96T/48T
蘆薈大黃素 Aloeemodin 質(zhì)量規(guī)格:>96%,BR 人抗IgA抗體(ai-IgA-Ab)試劑盒 Human ai-IgA aibody ELISA Kit
蘆薈大黃素(標(biāo)準(zhǔn)品) Aloeemodin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Rat8-isoprostaglandin,8-iso-PGELISAKit大鼠8異前列(8-iso-PG)elisa規(guī)格:96T/48T
(馬源) Cytochrome C 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,來源馬心 載玻片細(xì)胞PAR-2蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
(牛源) Cytochrome C 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,來源牛心 MonkeyInsulin,INSelisa猴胰島素(INS)elisa規(guī)格:96T/48T
(豬源) Cytochrome C 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,來源豬心 小鼠壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)elisa ,英文名: TNFsR-Ⅰ ELISA Kit
全血PCR增強(qiáng)液蒼山香茶菜素 HPLC≥98% 5mg P53(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升
長春堿衍生物 HPLC≥98% 5mg PA317包裝細(xì)胞克隆選擇培養(yǎng)基500毫升
長管貝殼杉素 E HPLC≥98% 5mg pADEASY-pSHTLE+目的基因腺病毒
長管假素D HPLC≥98% 5mg Pan-Ras鳥苷酸酶活性分析試劑盒6
長管假素E HPLC≥98% 5mg PAR-1(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克
長壽花糖甙 HPLC≥98% 5mg PAR-1蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒25
檉柳黃素 HPLC≥98% 5mg PAR-1蛋白共沉淀分析試劑盒5
橙黃胡椒酰胺乙酸酯 HPLC≥98% 5mg PAR-2(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克
橙皮內(nèi)酯水合物 HPLC≥98% 5mg PAR-2蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒25
赤麻木脂素 HPLC≥98% 5mg PAR-2蛋白共沉淀分析試劑盒5