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上海邦景實業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品： 進(jìn)口elisa試劑盒，細(xì)胞株，細(xì)胞系，菌種 |
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更新時間：2022-06-10 10:25:12瀏覽次數(shù)：199
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中文名稱：釀酒酵母AH109化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
英文名稱：E.coli AH109 Chemical Competent Cell
產(chǎn)品規(guī)格：10×100μL
發(fā)貨周期：1～3天
產(chǎn)品貨號：BJ-F0164423
產(chǎn)品介紹：
AH109菌株來源于PJ69-2A酵母菌株，將lacZ報告基因引入PJ69-2A誕生了AH109，此菌株是Clontech公司開發(fā)的GAL4系統(tǒng)酵母雙雜實驗用菌株，MATa型，可直接轉(zhuǎn)化質(zhì)?；蚺cMATα型酵母菌株Y187通過mating操作進(jìn)行蛋白互作驗證或篩庫試驗。Transformation marker為:trp1，leu2，報告基因為：lacZ，HIS3，ADE2，MEL1。AH109-GAL4酵母雙雜系統(tǒng)需要兩種質(zhì)粒配套使用：PGBKT7和PGADT7。質(zhì)粒PGBKT7的篩選標(biāo)志為TRP1，用于表達(dá)DNA-BD(來自酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4N端1～174位氨基酸)與目標(biāo)蛋白(Bait)的融合蛋白；質(zhì)粒PGADT7的篩選標(biāo)志為LEU，用于表達(dá)AD(GAL4 C端768～881位氨基酸)與目標(biāo)蛋白(Prey)的融合蛋白。 GAL4系統(tǒng)原理：一個完整的酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4可分為功能上相互獨立的兩個結(jié)構(gòu)域：位于N端1～174位氨基酸區(qū)段的DNA結(jié)合域(DNA-BD)和位于C端768～881位氨基酸區(qū)段的轉(zhuǎn)錄激活域(AD)。DNA-BD能夠識別GAL4-responsive gene的上游激活序列UAS，并與之結(jié)合。而AD可以啟動UAS下游的基因進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。BD和AD單獨存在不能激活轉(zhuǎn)錄，但當(dāng)二者接近時，則呈現(xiàn)完整的GAL4活性，使含有UAS的啟動子下游基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)。正常條件下，BD不與AD結(jié)合，將要檢測的蛋白質(zhì)分別與BD和AD融合，形成bait融合蛋白(bait -BD)和prey融合蛋白(prey-AD)，如果bait和prey發(fā)生相互作用，就會促使BD和AD的相互接近，形成完整的GAL4，從而激活報告基因的轉(zhuǎn)錄。AH109有四個報告基因：lacZ，HIS3，ADE2，MEL1，分別由三種不同的啟動子(GAL1，GAL2，MEL1)啟動，這三種啟動子只有GAL4識別的17bp核心區(qū)相同，其余部分均不同，大大降低了酵母雙雜假陽性發(fā)生的概率。本產(chǎn)品經(jīng)特殊工藝制作而成，經(jīng)PGADT7質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率為＞104cfu/μg DNA。 感受態(tài)細(xì)胞干冰運(yùn)輸、-80℃保存，Carrier DNA -20℃保存；PEG/LiAc 4℃保存；有效期半年。 |
使用方法：本產(chǎn)品僅用于科研
注意：標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個人防護(hù)。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封；每袋裝一份標(biāo)本。同時也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上，連同一級容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內(nèi)，擰緊蓋，在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本，可以放在同一個二級容器內(nèi)。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力，內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險標(biāo)注。
將二級容器擺放在專用運(yùn)輸箱內(nèi)(或疫苗運(yùn)輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質(zhì)填充，并密封，由專人(2人)運(yùn)送，不得郵寄，最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時內(nèi)送達(dá)，則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的，需在4℃冰箱短時間暫存，并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃～-40℃時不穩(wěn)定，故長期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。
注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
（cetyldimethylethammonium bromide）
4－氨基－3－肼基－5巰基－1，2，4－三氮唑（AHMT）
3－甲基－2－苯并噻唑腙鹽酸鹽（3-methyl-2-benzothiazolinone hydrazone；MBTH）
N－苯甲酰－L－精氨酰胺鹽酸鹽（BAA）
N――苯甲酰－DL－精對胺鹽酸鹽（BAPNA）
DL-丙 DL-Alanine 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR 英文名稱RatFree-T3ELISAKit大鼠游離三甲狀腺原(Free-T3)規(guī)格：96T/48T
DL-酪 DL-Tyrosine 質(zhì)量規(guī)格：0.98 高質(zhì)型ECL化學(xué)發(fā)光顯影試劑盒10
DL-甲硫;蛋 DL-Mine 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR ELISAKitAPT人異常原規(guī)格：48T/96T
DL-天冬 DL-Aspartic acid 質(zhì)量規(guī)格：0.98 小鼠精酸加壓素原(VP)elisa ，英文名： VP ELISA Kit
DL- DL-Glutamine 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA檢測試劑盒HumanαN-acetylglucosaminidase,αNAGELISAKit 96T/48T
DL-脯 DL-Proline 質(zhì)量規(guī)格：0.99 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2(VEGFR-2)試劑盒 Rat Vascular endothelial cell growth factor receptor 2,VEGFR-2/Flk-1 ELISA kit
DL-丙甲酯鹽酸鹽 DL-Alanine methyl ester 質(zhì)量規(guī)格：0.98 英文名稱RatFREEPSAELISAKit大鼠游離前列腺特異性抗原(FREEPSA)規(guī)格：96T/48T
L-谷5乙酯 H-Glu(OEt)-OH 質(zhì)量規(guī)格：0.985 高質(zhì)型ECL印跡化學(xué)發(fā)光溶液A液：100毫升B液：500微升1000cm2
N-乙酰-DL-亮 N-Acetyl-DL-leucine 質(zhì)量規(guī)格：0.98 ELISAKitiso-Hyd人異規(guī)格：48T/96T
N-碳芐氧基賴,N6-Cbz-L-賴 N6-Cbz-L-Lysine 質(zhì)量規(guī)格：98%，BR 小鼠精酸加壓素受體1B(AVPR1B)elisa ，英文名： AVPR1B ELISA Kit
釀酒酵母AH109化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞粉防己堿 Tetrandrine 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠S轉(zhuǎn)移酶α4(GSTα4)elisa ，英文名： GSTα4 ELISA Kit
佛手柑內(nèi)酯 5-Methoxypsoralen 質(zhì)量規(guī)格：GC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠S轉(zhuǎn)移酶θ1(GSTθ1)elisa ，英文名： GSTθ1 ELISA Kit
甘草酸(α型),18alpha-甘草酸 Glycyrrhetinic acid 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠S轉(zhuǎn)移酶θ2(GSTθ2)elisa ，英文名： GSTθ2 ELISA Kit
甘草苷 Liquiritin 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠S轉(zhuǎn)移酶ω1(GSTω1)elisa ，英文名： GSTω1 ELISA Kit
甘草素() Liquiritigenin 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠過氧化酶(GSH-Px)elisa ，英文名： GSH-Px ELISA Kit
甘草酸 Glycyrrhizic acid 質(zhì)量規(guī)格：UV>98%,BR 小鼠過氧化酶1(GPX1)elisa ，英文名： GPX1 ELISA Kit
甘草酸 Glycyrrhizic acid 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠谷酸半胱酸連接酶(GCLM)elisa ，英文名： GCLM ELISA Kit
鹽 Glycyrrhizic acid ammonium salt 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠谷酸半胱酸連接酶催化亞基(GCLC)elisa ，英文名： GCLC ELISA Kit
Glycyrrhizic acid ammonium salt 質(zhì)量規(guī)格：UV>97%,無水物,BR 小鼠谷酸脫氫酶(GDH)elisa ，英文名： GDH Diammonium Glycyrrhizate 質(zhì)量規(guī)格：UV≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠谷酸脫氫酶(GDH/GLDH)elisa ，英文名： GDH/GLDH ELISA Kit
生物醫(yī)學(xué)實驗中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養(yǎng)基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細(xì)小，傳統(tǒng)的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點，本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。
