上海邦景實業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品: 進口elisa試劑盒,細胞株,細胞系,菌種 |
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更新時間:2022-11-10 09:06:28瀏覽次數(shù):201
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技術(shù)原理:產(chǎn)品僅用于科研
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應(yīng)實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
33蠟狀芽孢桿菌33探針法檢測試劑盒 | Bacillus cereus E33 E33 | BJ-P9282 |
產(chǎn)品特點:
靈敏度高:可檢測個位拷貝數(shù)的基因
特異性高:有效避免非特異性擴增的出現(xiàn)
穩(wěn)定性高:復孔間差異小,實驗結(jié)果重復性強
擴增性能優(yōu):擴增效率高,熒光信號強
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為。
熒光定量PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
血液 DNAout150 次 一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( 高 pH)30 次
柱式血液 DNAout50 次 一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( 低 pH)30 次
柱式血液 DNAout200 次 一站式大提柱式 miRNAout5次
磁珠血液 DNAout50 次 一站式磁珠法植物 mRNAout50 次
柱式血液 DNA-RNAout50 次 一站式磁珠法真菌 mRNA 提取試劑盒50 次
一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( 中 pH)30 次 IPTG 干粉2.5g
一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( 低 pH)30 次 Ionomycin( 鈣離子載體 )250nmol
高 pH 緩沖液套裝30 次 Insulin18mg
中 pH 緩沖液套裝30 次 Indo-1,五銨鹽1mg
低 pH 緩沖液套裝30 次 Indo-1 AM1mg
大鼠肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶(CACT)elisa檢測試劑盒
大鼠溶質(zhì)載體家族2(易化葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白),成員2(SLC2A2)elisa檢測試劑盒
大鼠絨毛膜β(β-CG)elisa檢測試劑盒
大鼠絨毛膜(CG)elisa檢測試劑盒免費代測
大鼠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)elisa檢測試劑盒
M199培養(yǎng)基 500ml
Masson染色試劑盒120ml
Mayor`s蘇木素 20ml
McCoy’s 5A培養(yǎng)基 500ml
MEM培養(yǎng)基 500ml
33蠟狀芽孢桿菌33探針法檢測試劑盒實時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。