上海邦景實業(yè)有限公司
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更新時間:2022-08-10 13:21:31瀏覽次數(shù):168
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詳細描述:
產品名稱:伊氏李斯特菌探針法PCR熒光定量檢測試劑盒
英文名稱:Listeria ivanovii
貨號:BJ-P9751
規(guī)格:50T
分類:熒光定量PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
實驗外包:
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建
實驗過程:產品僅用于科研
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允?/span>DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
小鼠基質金屬蛋白酶-2 英文名稱: maix metalloproteinase 2 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: MMP-2 Diphenhydramine 中文名: 分子式:C17H22ClNO 度:98.0%
小鼠基質金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA試劑盒 DL-2-Amino-n-octanoic acid 644-90-6 中文名:DL-2-氨基正辛酸 分子式:C8H17NO2
小鼠基質金屬蛋白酶-1(mouse MMP-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 Dioxopromethazine 中文名:鹽 分子式:C17H21ClN2O2S 度:99.0%
小鼠基質金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA試劑盒 Diosgenin 中文名: 分子式:C27H42O3 度:98.0%
小鼠基脲敏感性胺氧化酶(SSAO)ELISA試劑盒 Candesartan 中文名:坎地沙 分子式:C24H20N6O3
鹽酸阿比朵爾(標準品) Arbidol HCl 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品 小鼠脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNASE1)ELISA試劑盒 ,英文名: DNASE1 ELISA Kit
Argatroban 質量規(guī)格:>99%,,細胞培養(yǎng)級 兔可溶性凋亡相關因子(sFAS/Apo-1)ELISA檢測試劑盒RabbitsolubleFactor-relatedApoptosis,sFAS/Apo-1ELISAKit 96T/48T
(標準品) Argatroban 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品 牛肉堿試劑盒 Bovine carnitine ELISA kit
醋酸精加壓素 Argipressin Acetate 質量規(guī)格:度98% 英文名稱Humaissueinhibitorofmaixmetalloproteinase-4,TIMP-4ELISAkit人基質金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)規(guī)格:96T/48T
Atenolol 質量規(guī)格:度大于98%,USPgrade 動物骨組織細胞分離培養(yǎng)試劑盒10
(標準品) Atenolol 質量規(guī)格:含量測定,HPLC>99%,標準品 RatprocollagenⅠN-terminalpeptide,PⅠNPELISA試劑盒大鼠Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鈣 Atorvastatin calcium 質量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于細胞培養(yǎng) 小鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA試劑盒 ,英文名: DPD ELISA Kit
鈣(標準品) Atorvastatin calcium 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品 小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA檢測試劑盒Mouseglucoprotein130,gp130ELISAKIT 96T/48T
阿扎胞苷/5-氮雜胞核苷(進分) Azacitidine (5-Azacytidine) 質量規(guī)格:> 98%,進分,Sigma A2385 人胱抑素A(CSTA/STF1/STFA)試劑盒 Human Cystatin-A,CSTA/STF1/STFA ELISA kit
5-氮胞苷/阿扎胞苷/5-氮雜胞核苷 Azacitidine (5-Azacytidine) 質量規(guī)格:度> 98%,BR,可用于細胞培養(yǎng) RatEpithelial-Cadherin,E-CadELISAKit大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
魚類組織汞元素比色法定量檢測試劑盒
土壤汞元素比色法定量檢測試劑盒
水質汞元素比色法定量檢測試劑盒
通用型汞元素比色法定量檢測試劑盒
汞元素檢測樣品處理試劑盒
伊氏李斯特菌探針法PCR熒光定量檢測試劑盒植物細胞原生質體轉染試劑盒
植物線粒體形態(tài)染色試劑盒
植物種子葉綠體粗提分離試劑盒
植物種子活性葉綠體分離試劑盒
植物種子高質純化葉綠體分離試劑盒
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。