上海邦景實業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品: 進口elisa試劑盒,細胞株,細胞系,菌種 |
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更新時間:2022-08-10 11:47:19瀏覽次數(shù):209
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實驗外包:
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉(zhuǎn)錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建
詳細描述:
產(chǎn)品名稱:禽腺病毒E型探針法PCR熒光定量檢測試劑盒
英文名稱:Fowl Adenovirus(FAdV-E)
貨號:BJ-P9593
規(guī)格:50T
分類:熒光定量PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
實驗過程:產(chǎn)品僅用于科研
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允?/span>DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。
小鼠皮質(zhì) 英文名稱: Mouse Coicosterone 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: CO Chrysophanol 8-O-glucoside 中文名: 分子式:C21H20O9 度:97.5%
小鼠胚胎干細胞系MESPU30(M30)ELISA試劑盒 Furosemide 中文名: 分子式:C12H11ClN2O5S 度:98.0%
小鼠胚胎干細胞系MESPU30(M30)ELISAKit Ergosterol 中文名:麥角甾醇 分子式:C28H44O
小鼠膀胱抗原(BTA)ELISA試劑盒 Furazolidone 中文名:唑酮 分子式:C8H7N3O5 度:98.0%
小鼠牛血清白蛋白elisa試劑盒 小鼠牛血清白蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠牛血清白蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠牛血清白蛋白試劑盒、小鼠牛血清白蛋白elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Ganciclovir 中文名: 分子式:C9H13N5O4
,十八烷二醇 HPLC≥98% 5mg 小鼠小核糖核蛋白多肽D1(SPD1)ELISA試劑盒 ,英文名: SPD1 ELISA Kit
,:,二o異亞丙基betad吡喃果糖 HPLC≥98% 5mg 兔子脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA檢測試劑盒deoxypyridinoline,DPDELISAKit 96T/48T
,O異亞丙基betaD吡喃果糖 HPLC≥98% 5mg 牛脂聯(lián)素(ADP)試劑盒 Bovine adiponectin,ADP ELISA Kit
,,,四羥基氧蒽酮 HPLC≥98% 5mg 英文名稱HumanPlasminogenactivator,urokinase(PLAU,uPA)ELISAkit人型血漿酶原激活因子(PA)規(guī)格:96T/48T
,,桉葉烷三醇 HPLC≥98% 5mg 蛋白樣品層析法去內(nèi)試劑盒20
,二噁螺[.]癸醇 HPLC≥98% 5mg Ratmuscarinicacetylcholinereceptor,M-AChRELISA試劑盒大鼠受體(M-AChR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
,二表,柏木烷二醇 HPLC≥98% 5mg 小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)ELISA試劑盒 ,英文名: AFP-L3 ELISA Kit
()去氫腋生依瓦菊素 HPLC≥98% 5mg 小鼠腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA檢測試劑盒Mouseadrenomedullin,ADMELISAKit 96T/48T
,二羥基貝殼杉烯酸 HPLC≥98% 5mg 人花生四烯酸(AA)試劑盒 Human Arachidonic Acid,AA ELISA Kit
Beta羥基洋椿苦素 HPLC≥98% 5mg RatCrosslaps,CrELISAKit大鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
口糖比色法定量檢測試劑盒
飲料比色法定量檢測試劑盒
通用型比色法定量檢測試劑盒
植物游離氨基酸含量熒光定量檢測試劑盒
體液游離氨基酸含量熒光定量檢測試劑盒
禽腺病毒E型探針法PCR熒光定量檢測試劑盒細菌尿肉湯
細菌苯丙瓊脂平板
細菌蛋白胨鐵瓊脂平板
細菌KLIGLER含鐵瓊脂平板
細菌色肉湯