上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: 進(jìn)口elisa試劑盒,細(xì)胞株,細(xì)胞系,菌種 |
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更新時(shí)間:2022-06-13 11:06:35瀏覽次數(shù):211
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操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。
中文名稱(chēng):DNA加A尾試劑盒
英文名稱(chēng):Flat end DNA add A tail Kit
產(chǎn)品規(guī)格:50次
發(fā)貨周期:1~3天
產(chǎn)品貨號(hào):BJ-F0164568
生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中,常常需要從液體樣品(如血漿,培養(yǎng)基)中純化病毒,但由于病毒顆粒十分細(xì)小,傳統(tǒng)的分離方法是使用長(zhǎng)時(shí)間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來(lái),此操作非常繁瑣,并且病毒在此過(guò)程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn),本公司開(kāi)發(fā)了本產(chǎn)品。
產(chǎn)品介紹:
本試劑盒提供了加A尾需要的所有成分,可以在20分鐘左右完成整個(gè)過(guò)程。由Pfu、Pwo、Vent或KOD等有3’→5’外切酶活性的高保真DNA聚合酶擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物為不帶A尾的平末端DNA片段,如該平末端DNA片段需要和T載體相連接,需要先用Taq DNA polymerase在平末端片段后加上A尾后才能與T載體的T頭互補(bǔ)連接。 試劑盒組分: Taq DNA polymerase——————————50μl 10×A-tailing buffer—————————50μl dATP Mix———————————————50μl 操作步驟: 1. 平末端PCR 產(chǎn)物用PCR 清潔(無(wú)非特異擴(kuò)增)或者膠回收純化(有非特異擴(kuò)增)。 2. 純化好的平末端DNA 片段按以下反應(yīng)體系加A尾: 平末端DNA 片段—————————7μl(不過(guò)1μg) dATP Mix————————————1μl 10×A-tailing buffer——————1μl Taq DNA polymerase———————1μl 3. 輕輕混勻后72℃保溫20-30 分鐘。 4. 加A 尾的產(chǎn)物可以不需要再次清潔或者膠回收純化,可直接用于連接反應(yīng)。 儲(chǔ)存條件:-20℃。 |
使用方法:本產(chǎn)品僅用于科研
注意:標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個(gè)人防護(hù)。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級(jí)容器)。
鼻拭子的采集:將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處,停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集:用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁,將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
直接在一級(jí)容器上用油性記號(hào)筆寫(xiě)明樣本的種類(lèi)、采樣時(shí)間、編號(hào)、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封;每袋裝一份標(biāo)本。同時(shí)也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上,連同一級(jí)容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級(jí)容器)內(nèi),擰緊蓋,在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本,可以放在同一個(gè)二級(jí)容器內(nèi)。二級(jí)容器要承受不少于95 KPa的壓力,內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險(xiǎn)標(biāo)注。
將二級(jí)容器擺放在專(zhuān)用運(yùn)輸箱內(nèi)(或疫苗運(yùn)輸箱),放入冰排,然后以柔軟物質(zhì)填充,并密封,由專(zhuān)人(2人)運(yùn)送,不得郵寄,最好使用專(zhuān)車(chē)。
采集的標(biāo)本若不能在24小時(shí)內(nèi)送達(dá),則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無(wú)-70℃條件的,需在4℃冰箱短時(shí)間暫存,并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃~-40℃時(shí)不穩(wěn)定,故長(zhǎng)期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。
RPE蛋白標(biāo)記試劑盒(不含RPE)
TEXAS RED蛋白標(biāo)記試劑盒
FAM蛋白標(biāo)記試劑盒
APC蛋白標(biāo)記試劑盒
AMCA蛋白標(biāo)記試劑盒
纖維素(20000~30000 mpa.s) Hydroxyethyl Cellulose 質(zhì)量規(guī)格:粘度20000~30000 mpa.s 大鼠釋放激素(GH)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratgonadoopin-releasinghormone,GHELISAKit 96T/48T
纖維素(5500-6500 mpa.s) Hydroxyethyl Cellulose 質(zhì)量規(guī)格:粘度5500-6500 mpa.s 人蛋白B(PKB)試劑盒 Human protein kinase B,PKB ELISA Kit
纖維素(40~60 mpa.s) Hydroxyethyl Cellulose 質(zhì)量規(guī)格:粘度40~60 mpa.s Ratphospho-inhibitorysubunitofNF-κBα,pIKBαELISAKit大鼠0酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)elisa規(guī)格:96T/48T
異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG) Isopropyl β-D-thiogalactoside 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR GRACE’S昆蟲(chóng)培養(yǎng)基1/10升(片劑)
甘露糖;D-甘露糖 D-Mannose 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR MouseSuperOxidaseDimase,SODelisa小鼠氧化物歧化酶(SOD)elisa規(guī)格:96T/48T
D-甘露糖(標(biāo)準(zhǔn)品) D-Mannose 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)elisa ,英文名: pANCA ELISA Kit
N-辛?;?/span>-N-甲基葡糖胺(MEGA-8) N-Octanoyl-N-methylglucamine 質(zhì)量規(guī)格:≥97% ,進(jìn)分 大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratcoicoopieleasinghormone,CRHELISAKit 96T/48T
N-癸?;?/span>-N-甲基葡糖胺(MEGA-10) N-Decanoyl-N-methylglucamine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人蛋白基因產(chǎn)物9.5(PGP 9.5)試劑盒 Human PGP 9.5 ELISA Kit
辛基-β-D-硫代吡喃葡萄糖苷 n-Octyl-β-D-Thioglucopyranoside 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR RatPhospholipidaseA2,PL-A2ELISAKit大鼠0脂酶A2(PL-A2)elisa規(guī)格:96T/48T
D-綿子糖五水;蜜三糖五水 D(+)-Raffinose pentahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Gresshoff&Doy基礎(chǔ)培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
DNA加A尾試劑盒構(gòu)樹(shù)堿A Broussonetine A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA檢測(cè)試劑盒Rabbitpigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISAKit 96T/48T
Oleanolic acid-3-O-β-D-glucopyranosyl (1→2)-α-L-arabinopyranoside Oleanolic acid-3-O-β-D-glucopyranosyl (1→2)-α-L-arabinopyranoside 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 兔腎素(Renin)ELISA檢測(cè)試劑盒RabbieninELISAKit 96T/48T
Sapindoside A Sapindoside A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 兔糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISA檢測(cè)試劑盒RabbitGlycatedhemoglobinA1c,A1cELISAKit 96T/48T
卡博替尼蘋(píng)果酸鹽 ;XL184(S)-malate Cabozantinib (S)-malate(BMS907351-(S)-malate) 質(zhì)量規(guī)格:>99%,廣譜酪抑制劑 兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA檢測(cè)試劑盒Rabbitplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit 96T/48T
Presapogenin CP4 Presapogenin CP4 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 兔纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA檢測(cè)試劑盒RabbitThrombinactivatablefibrinolysisinhibitor,TAFIELISAKit 96T/48T
12-O-Tiglylphorbol-13 –isobutyrate 12-O-Tiglylphorbol-13 –isobutyrate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 兔血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA檢測(cè)試劑盒RabbitangiotensionⅡ,ANG-ⅡELISAKit 96T/48T
佛波醇12-十四酸酯13-乙酸酯 Phorbol 12-myristate 13-acetate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 兔血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA檢測(cè)試劑盒RabbitVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISAKit 96T/48T
藤黃酸 Gambogic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%,標(biāo)準(zhǔn)品 兔血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA檢測(cè)試劑盒RabbitVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAkit 96T/48T
五味子酚 schisanhenol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 兔血管生成素2(ANG-2)ELISA檢測(cè)試劑盒RabbitAngiopoietin2,ANG-2ELISAKit 96T/48T
FMOC-3,5-二-L-酪 FMoc-Tyr(3,5-I2)-OH 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 兔血管性血友病因子/瑞斯托輔因子(VWF)ELISA檢測(cè)試劑盒RabbitvonWillebrandFactor,VWFELISAKit 96T/48T
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。