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操作流程：
1待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。
2酶標板置4℃，包被過夜。
3洗板：吸干孔內反應液，用洗滌液過洗一遍將洗滌液注滿板孔后，即甩去，之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
4陰性對照孔每孔加入pbs 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人aif抗體工作液50μl。
5酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內，孵育60min。
6洗板，同4。
7每孔加1:5000稀釋的hrp-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
8酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內，孵育60min。
9洗板，同4。
10每孔加tmb顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。
11每孔加100μl 2mol/l h2so4終止反應。
12分別測450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2，終測得的od值為兩者之差w1-w2，以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
13數(shù)據處理：在得出標本s和陰性對照n的 od值后，計算s/n值。s/n≥2.1為陽性判定標準。

試劑盒組成及試劑配制：
1. 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。
2. 標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4. 標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6. 標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7. 辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
試劑和樣本的控制方法：
一、試劑
1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關，我司嚴格按照進行，已獲得國家承認的“三證"，每一個產品都有對應的批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產品，不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。
2.試劑的準備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應微孔內的溫度較快地達到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內源性干擾因素：包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；
類風濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測抗原時，可用加入到標本稀釋液中使RF降解。
ELISA 試驗時，注意事項如下：
1. 正式試驗時，應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件，待檢樣品應作一式二份，以保證實驗結果的準確性。有時本底較高，說明有非特異性反應，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括:
（1） 固相載體的選擇：許多物質可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應，觀察其顯色反應是否均一性，據此判明其吸附性能是否良好。
（2） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時。蛋白質包被的zui適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進行包被后，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質來說通常為1～10μg／ml。
（3） 酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定（見酶標記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法"（包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
（4） 酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入 。
人可溶性白細胞抗原G(sHLA-G)                 Capecitabine   分子式：C15H22FN3O6 

人可溶性P選擇素(sP-selectin)     Tigecycline  中文名：  分子式：C29H39N5O8 

人抗心0脂抗體IgM(ACA-IgM)     Tigogenin  77-60-1  中文名：劍麻皂素  分子式：C27H44O3  度：98.0%  關鍵詞：  毛地黃屬; 萬年蘭屬; 螺甾烷; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫

人抗心0脂抗體IgG(ACA-IgG)                 Tigogenin  77-60-1  中文名：劍麻皂素  分子式：C27H44O3 

人抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)     Tigogenin  中文名：劍麻皂素  分子式：C27H44O3
Mecobalamin  質量規(guī)格：>98%,BR Plagrowthhormone,GH試劑盒植物生長激素(GH)試劑盒

  (S)-Ketoprofen trometamol  質量規(guī)格：>98.5%,BR 小鼠基質細胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)試劑盒 ，英文名： SDF-1a/CXCL12

(標準品)  (S)-Ketoprofen trometamol  質量規(guī)格：含量測定 大鼠酸M2型同工酶(M2-PK)檢測試劑盒RatPyruvateKinase,M2-PK

植物凝膠(Sigma)  Phytagel  質量規(guī)格：進分;SigmaP8169 人成纖維細胞生長因子23(FGF-23)試劑盒 Human fibroblast growth factor-23,FGF-23

  (S)-(+)-Ketoprofen  質量規(guī)格：>98.5% RatsubstancePreceptor,SP-R大鼠P物質受體(SP-R)試劑盒

5-磺基水楊酸  sulfosalicyclic acid  質量規(guī)格：AR JM109鈣轉感受態(tài)細菌5X200微升

1-氨基-2-萘酚-4-磺酸  1-Amino-2-naphthol-4-sulfonic Acid   質量規(guī)格：AR Plahormoneabscisicacid,ABA試劑盒植物激素脫落酸(ABA)試劑盒

卡西平；10,11-二氫-10-羥 10,11-Dihydro-10-hydroxy Carbamazepine   質量規(guī)格：>98%,美國進口原裝 小鼠基質細胞衍生因子1(SDF1)試劑盒 ，英文名： SDF1

三七皂苷R2(S型)(標準品)  S-Notoginsenoside R2  質量規(guī)格：HPLC≥90%，標準品 人葡萄糖60酸異構酶(GPI)檢測試劑盒Humanglucose-6-phosphateisomerase,GPI

無水醋酸鋅  Zinc acetate  質量規(guī)格：AR 大鼠纖維蛋白原β鏈(Fgb/Ab1-181/Ab1-216/Ac1-581)試劑盒 Rat fibrinogen beta chain
乙醇脫氫酶ADH測試盒測組織 50管/48樣 紫外比色法
IL-17豚鼠白介素17檢測試劑盒小鼠β-防御素3(β-BD-3)elisa檢測試劑盒

小鼠β-防御素3 elisa檢測試劑盒

小鼠β-防御素3 elisa分析檢測試劑盒

小鼠β-防御素2（β-BD-2）elisa檢測試劑盒

小鼠β防御素2(β-BD-2)elisa檢測試劑盒
注：本公司提供試劑盒免費代測服務。需要其他Elisa試劑盒請咨詢銷售人員。產品僅用于科研