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上海聯(lián)邁生物工程有限公司
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更新時間:2018-06-12 14:29:42瀏覽次數(shù):244次
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柱式DNA PAGE膠回收試劑盒聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)是目前分離小片段DNA的主要方法,但是目前市場上沒有專門的產(chǎn)品用于從聚丙烯酰胺凝膠中回收DNA片段,本產(chǎn)品就是聯(lián)邁基因專門為此用途而開發(fā)的。它具有下列特點:
1. 可以回收50-500 bp范圍內(nèi)的各種長度的單鏈或雙鏈DNA。
2. 溶液A中含有聯(lián)邁基因DNA助沉劑RNADOWN,使100 bp以下的DNA回收率高達80%以上(注意:D
柱式DNA PAGE膠回收試劑盒
名稱 | 規(guī)格 | 價格 | 手冊 |
柱式DNA PAGE膠回收試劑盒 | 50次 | 790元 |
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聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)是目前分離小片段DNA的主要方法,但是目前市場上沒有專門的產(chǎn)品用于從聚丙烯酰胺凝膠中回收DNA片段,本產(chǎn)品就是聯(lián)邁基因專門為此用途而開發(fā)的。它具有下列特點:
1. 可以回收50-500 bp范圍內(nèi)的各種長度的單鏈或雙鏈DNA。
2. 溶液A中含有聯(lián)邁基因DNA助沉劑RNADOWN,使100 bp以下的DNA回收率高達80%以上(注意:DNA長度越長,回收率越低)。
3. 一站式,即開即用,操作簡單,用戶不需要自備任何試劑。
4. 擴容性好,可小規(guī)模操作,也可以大規(guī)模操作。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質分離,并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進入水相,離心后可形成水相層和有機層,這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產(chǎn)物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經(jīng)反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離,當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時,變性的質粒DNA又恢復原來的構型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復性而形成纏連的網(wǎng)狀結構,通過離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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