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石蠟包埋組織全基因組擴(kuò)增試劑盒

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更新時間：2018-06-13 15:00:27瀏覽次數(shù)：210次

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上海聯(lián)邁生物工程有限公司

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產(chǎn)品簡介

石蠟包埋組織全基因組擴(kuò)增試劑盒本產(chǎn)品是用于從石蠟包埋組織中制備和擴(kuò)增全基因組的試劑盒。通常從福爾馬林固定石蠟包埋組織中得到的DNA會發(fā)生快速降解，因?yàn)槭褂酶栺R林固定會導(dǎo)致DNA鏈斷裂，堿基損壞以及發(fā)生DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)（DPC），使以石蠟包埋組織為材料擴(kuò)增基因組DNA產(chǎn)生極大的困難。本產(chǎn)品以通過修補(bǔ)反應(yīng)，使發(fā)生損壞的DNA能夠進(jìn)行全基因組擴(kuò)增，提高了實(shí)驗(yàn)效率，可以得到良好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，滿足客戶實(shí)驗(yàn)

詳細(xì)介紹

石蠟包埋組織全基因組擴(kuò)增試劑盒

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石蠟包埋組織全基因組擴(kuò)增試劑盒	30次	詢價(jià)

本產(chǎn)品是用于從石蠟包埋組織中制備和擴(kuò)增全基因組的試劑盒。通常從福爾馬林固定石蠟包埋組織中得到的DNA會發(fā)生快速降解，因?yàn)槭褂酶栺R林固定會導(dǎo)致DNA鏈斷裂，堿基損壞以及發(fā)生DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)（DPC），使以石蠟包埋組織為材料擴(kuò)增基因組DNA產(chǎn)生極大的困難。本產(chǎn)品以通過修補(bǔ)反應(yīng)，使發(fā)生損壞的DNA能夠進(jìn)行全基因組擴(kuò)增，提高了實(shí)驗(yàn)效率，可以得到良好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，滿足客戶實(shí)驗(yàn)需要。本產(chǎn)品有如下優(yōu)點(diǎn)：

1．增加了一管式DNA修補(bǔ)處理步驟，使短片段DNA也能用于WGA。

2．即開即用，不需要單獨(dú)準(zhǔn)備所需試劑。

3．具有高保真，高產(chǎn)量的特點(diǎn)，可以擴(kuò)增石蠟包埋組織的基因組達(dá)上萬倍。

4．適用于各種石蠟包埋組織樣品。

5． WGA產(chǎn)物可用于多種后續(xù)試驗(yàn)，包括多重PCR、長片斷PCR、定量PCR、克隆、文庫構(gòu)建、單倍型分析、測序、基因芯片分析、各種遺傳分析（片段差異、微衛(wèi)星差異、SNP、STR）等。

6．可與本公司石蠟包埋組織DNA提取試劑盒（CAT#：70502）配合使用得到更好的實(shí)驗(yàn)效果。

RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相，離心后可形成水相層和有機(jī)層，這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會*分離，當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時，變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
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