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單孢子全基因組擴(kuò)增試劑盒

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更新時間：2018-06-13 15:01:34瀏覽次數(shù)：211次

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  分子生物學(xué)

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克隆及表達(dá)產(chǎn)品

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RNA純化產(chǎn)品

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產(chǎn)品簡介

單孢子全基因組擴(kuò)增試劑盒本產(chǎn)品是用于從單個真菌孢子中擴(kuò)增全基因組的試劑盒（此產(chǎn)品需自行分離單孢子）。本產(chǎn)品有如下優(yōu)點(diǎn)：
1．可以直接用孢子進(jìn)行全基因組擴(kuò)增，避免了提取孢子DNA過程中的樣品損失。

詳細(xì)介紹

單孢子全基因組擴(kuò)增試劑盒

名稱	規(guī)格	價格	手冊
單孢子全基因組擴(kuò)增試劑盒	30次	詢價

本產(chǎn)品是用于從單個真菌孢子中擴(kuò)增全基因組的試劑盒（此產(chǎn)品需自行分離單孢子）。本產(chǎn)品有如下優(yōu)點(diǎn)：

1．可以直接用孢子進(jìn)行全基因組擴(kuò)增，避免了提取孢子DNA過程中的樣品損失。

2．即開即用，不需要單獨(dú)準(zhǔn)備所需試劑。

3．具有高保真高產(chǎn)量的特點(diǎn)，可以擴(kuò)增單個孢子的基因組達(dá)上萬倍。

4．適用于各種真菌孢子樣品。

5． WGA產(chǎn)物可用于多種后續(xù)試驗(yàn)，包括多重PCR、長片斷PCR、定量PCR、克隆、文庫構(gòu)建、單倍型分析、測序、基因芯片分析、各種遺傳分析（片段差異、微衛(wèi)星差異、SNP、STR）等。

RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相，離心后可形成水相層和有機(jī)層，這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會*分離，當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時，變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
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