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M15大腸桿菌

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更新時(shí)間:2018-06-14 15:25:28瀏覽次數(shù):224次

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產(chǎn)品簡介

M15大腸桿菌本產(chǎn)品為E. coli M15菌株,來源于K12品系。細(xì)胞含有包含反式lac 抑制子的pREP4質(zhì)粒,保證高度調(diào)控的表達(dá)。菌株攜帶有阻抑質(zhì)粒pREP4,該質(zhì)粒高水平的表達(dá)lac抑制子,在IPTG誘導(dǎo)前反式抑制蛋白表達(dá)。通過卡那霉素抗性篩選可以保持pREP4質(zhì)粒在菌株中的穩(wěn)定性。M15菌株具有卡那霉素抗性。

詳細(xì)介紹

 

M15大腸桿菌

名稱

規(guī)格

價(jià)格

手冊(cè)

M15大腸桿菌

1 管

詢價(jià)

 

本產(chǎn)品為E. coli M15菌株,來源于K12品系。細(xì)胞含有包含反式lac 抑制子的pREP4質(zhì)粒,保證高度調(diào)控的表達(dá)。菌株攜帶有阻抑質(zhì)粒pREP4,該質(zhì)粒高水平的表達(dá)lac抑制子,在IPTG誘導(dǎo)前反式抑制蛋白表達(dá)。通過卡那霉素抗性篩選可以保持pREP4質(zhì)粒在菌株中的穩(wěn)定性。M15菌株具有卡那霉素抗性。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質(zhì)分離,并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí),它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相,離心后可形成水相層和有機(jī)層,這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離,當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí),變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),通過離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
相關(guān)產(chǎn)品列表:

L-Glutathione (reduced form)(抗氧化劑)

Lipoic acid(抗氧化劑)

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LPS (TLR4激活劑)

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Monensin (蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑)

NAC(抗氧化劑)

Nicotinamide (Sirt1抑制劑)

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