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動植物膜蛋白微量制備試劑盒

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更新時間：2018-06-15 13:11:59瀏覽次數(shù)：309次

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產(chǎn)品簡介

動植物膜蛋白微量制備試劑盒細胞膜蛋白質(zhì)參與了很多重要的細胞活動，根據(jù)它們與膜結(jié)合的位置一般分為兩種，一種是附著在細胞膜上，另一類是嵌入到細胞膜中間。附著型膜蛋白疏水性較弱，比較容易提取和純化；而嵌入型膜蛋白疏水型很強，所以在水溶液里面很難溶解，非常難以提取和純化。LMAI Bio基因根據(jù)上述特點，經(jīng)過精心優(yōu)化的、開發(fā)出專門用于分離純化這兩種膜蛋白的兩款產(chǎn)品，它們具有下列特點：

詳細介紹

動植物膜蛋白微量制備試劑盒

名稱	規(guī)格	價格	手冊
動植物膜蛋白微量制備試劑盒	50次	490元

細胞膜蛋白質(zhì)參與了很多重要的細胞活動，根據(jù)它們與膜結(jié)合的位置一般分為兩種，一種是附著在細胞膜上，另一類是嵌入到細胞膜中間。附著型膜蛋白疏水性較弱，比較容易提取和純化；而嵌入型膜蛋白疏水型很強，所以在水溶液里面很難溶解，非常難以提取和純化。LMAI Bio基因根據(jù)上述特點，經(jīng)過精心優(yōu)化的、開發(fā)出專門用于分離純化這兩種膜蛋白的兩款產(chǎn)品，它們具有下列特點：

1. 兩步法提取，即先純化細胞膜，再純化膜蛋白，其他成分（核酸和其他蛋白質(zhì)）污染較少，膜蛋白純度遠高于總蛋白提出（注意：總蛋白提取得到的蛋白質(zhì)中也有膜蛋白）。

2. A型適用于附著型膜蛋白，B型適合于整合型膜蛋白。

3. 含多種增溶劑，能使各種膜蛋白都能很好地溶解在水溶液中。

4. 既適用于原核細胞，也適用于真核細胞，既適用于培養(yǎng)細胞，也適用于組織細胞。

RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離，當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時，變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
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