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細(xì)菌總蛋白質(zhì)微量提取試劑盒

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更新時間：2018-06-15 13:22:00瀏覽次數(shù)：204次

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產(chǎn)品簡介

細(xì)菌總蛋白質(zhì)微量提取試劑盒本試劑盒適用于細(xì)菌天然總蛋白的快速微量提取，可用于各種后續(xù)實(shí)驗研究。本產(chǎn)品的其主要特點(diǎn)是：
1. 可以處理各種細(xì)菌菌體，包括新鮮菌液或冰凍菌體沉淀。
2. 在1.5 mL塑料離心管中操作，適用于大規(guī)模的快速篩選。
3. 采用溫和的中性裂解成分，蛋白保持天然活性。
4. 無須昂貴設(shè)備，無需溶菌酶、超聲波破碎等復(fù)雜的操作步驟，離心分離即可得到，簡單便捷。
5. 得到的提取物可

詳細(xì)介紹

細(xì)菌總蛋白質(zhì)微量提取試劑盒

名稱	規(guī)格	價格	手冊
細(xì)菌總蛋白質(zhì)微量提取試劑盒	30次	590元

本試劑盒適用于細(xì)菌天然總蛋白的快速微量提取，可用于各種后續(xù)實(shí)驗研究。本產(chǎn)品的其主要特點(diǎn)是：

1. 可以處理各種細(xì)菌菌體，包括新鮮菌液或冰凍菌體沉淀。

2. 在1.5 mL塑料離心管中操作，適用于大規(guī)模的快速篩選。

3. 采用溫和的中性裂解成分，蛋白保持天然活性。

4. 無須昂貴設(shè)備，無需溶菌酶、超聲波破碎等復(fù)雜的操作步驟，離心分離即可得到，簡單便捷。

5. 得到的提取物可以直接用于SDS-PAGE、2D電泳、免疫印跡分析、蛋白活性測定和BCA法和及Lowry法蛋白定量（不適用于Bradford法）。

RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相，離心后可形成水相層和有機(jī)層，這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會*分離，當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時，變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
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