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WGA 糖蛋白分離試劑盒

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更新時(shí)間:2018-06-15 13:28:53瀏覽次數(shù):204次

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

WGA 糖蛋白分離試劑盒 本產(chǎn)品是基于WGA(麥胚凝集素,Wheat Germ Agglutinin)純化糖蛋白原理開發(fā)的產(chǎn)品,可用于從復(fù)雜的蛋白混合物中分離糖蛋白。
1.回收率高,與其他供應(yīng)商的試劑盒及凝集素樹脂相比具有相等或者更高的糖蛋
  白回收率;
2.快速,可以在一小時(shí)以內(nèi)純化糖蛋白。
3.通用,從多種樣品類型中分離糖蛋白;例如人血清及細(xì)胞裂解液。

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WGA 糖蛋白分離試劑盒

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WGA 糖蛋白分離試劑盒

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 本產(chǎn)品是基于WGA(麥胚凝集素,Wheat Germ Agglutinin)純化糖蛋白原理開發(fā)的產(chǎn)品,可用于從復(fù)雜的蛋白混合物中分離糖蛋白。

1.回收率高,與其他供應(yīng)商的試劑盒及凝集素樹脂相比具有相等或者更高的糖蛋

  白回收率;

2.快速,可以在一小時(shí)以內(nèi)純化糖蛋白。

3.通用,從多種樣品類型中分離糖蛋白;例如人血清及細(xì)胞裂解液。

4.穩(wěn)定,處理樣品時(shí)凝集素不會(huì)從樹脂上泄漏。

5.方便,該試劑盒包括植物凝集素樹脂、離心柱及實(shí)驗(yàn)所需的所有試劑;與

  Bradford法蛋白定量分析兼容,在蛋白定量分析之前不需要進(jìn)行透析或通過沉  淀回收糖蛋白。

RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質(zhì)分離,并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí),它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相,離心后可形成水相層和有機(jī)層,這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測(cè)定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離,當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí),變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),通過離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
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