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更新時間:2018-06-15 13:34:44瀏覽次數(shù):209次
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蛋白折疊試劑盒本產(chǎn)品提供使用矩陣方法來確定重組蛋白重折疊的緩沖體系,其中,重組蛋白是通過從包涵體中變性、溶解得到的。基礎緩沖體系所形成的矩陣中包含了防止蛋白聚集的強和弱的變性條件。并且可以根據(jù)重折疊的蛋白類型的不同向其中加入額外的矩陣因子(詳情見下表)。可以檢測三個濃度水平的緩沖液成分,因此可以在一個實驗中測試多種重折疊條件??烧{(diào)節(jié)的設計確保能夠篩選出針對目標蛋白的特定重折疊條件,防止浪費樣品和進
蛋白折疊試劑盒
名稱 | 規(guī)格 | 價格 | 手冊 |
蛋白折疊試劑盒 | 100次 | 詢價 |
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本產(chǎn)品提供使用矩陣方法來確定重組蛋白重折疊的緩沖體系,其中,重組蛋白是通過從包涵體中變性、溶解得到的?;A緩沖體系所形成的矩陣中包含了防止蛋白聚集的強和弱的變性條件。并且可以根據(jù)重折疊的蛋白類型的不同向其中加入額外的矩陣因子(詳情見下表)。可以檢測三個濃度水平的緩沖液成分,因此可以在一個實驗中測試多種重折疊條件??烧{(diào)節(jié)的設計確保能夠篩選出針對目標蛋白的特定重折疊條件,防止浪費樣品和進行不必要的分析,同時可以大化重折疊的產(chǎn)量。蛋白重折疊試劑盒中有一份詳盡的重折疊指南,其中包括分離、溶解和純化包涵體的詳細信息;優(yōu)化重折疊條件的詳細信息;以及分析重折疊收率的詳細信息。每種基礎重折疊緩沖液均以1.1X儲備液的形式提供。每種儲備液均含有濃度的變性劑以及55 mM Tris、21 mM NaCl、0.88 mM KCl,pH為 8.2。加入增溶的蛋白樣品會額外的引入胍(鹽酸胍)。
客戶可根據(jù)其需要從提供的添加劑中挑選因子3和因子4來制備定制的重折疊條件。表中的數(shù)字表明不同添加劑的濃度水平。
產(chǎn)品特點:
1. 可靠,所檢測的條件和成分均為重折疊緩沖液中常用、重要的。
2. 方便 , 三個水平的矩陣設計明顯地降低第二次優(yōu)化和數(shù)據(jù)分析的難度。
3. 可調(diào)節(jié),可以按照不同的目標蛋白定制不同的重折疊實驗;詳細說明了緩沖液成分之間的正向和反向的相互作用,避免了不必要的分析。
4. 高純試劑,按照極其嚴格的標準配制試劑,因此可以獲得穩(wěn)定的結果。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質分離,并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進入水相,離心后可形成水相層和有機層,這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產(chǎn)物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經(jīng)反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離,當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時,變性的質粒DNA又恢復原來的構型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復性而形成纏連的網(wǎng)狀結構,通過離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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