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更新時間:2018-06-15 13:47:33瀏覽次數(shù):239次
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HRP標(biāo)記的兔抗GST標(biāo)簽多抗本產(chǎn)品是用HRP(辣根過氧化酶)標(biāo)記的、抗GST標(biāo)簽蛋白的兔多克隆抗體,用于檢測細(xì)菌、酵母或昆蟲細(xì)胞表達(dá)的、帶GST的重組蛋白,用于表達(dá)純化過程中追蹤重組蛋白的完整性和回收率。多克隆抗體是用親和層析的方法制備,然后體外與HRP偶聯(lián)。帶本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 抗體帶有HRP,不再需要二抗。
HRP標(biāo)記的兔抗GST標(biāo)簽多抗
名稱 | 規(guī)格 | 價格 | 手冊 |
HRP標(biāo)記的兔抗GST標(biāo)簽多抗 | 20µL | 詢價 |
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本產(chǎn)品是用HRP(辣根過氧化酶)標(biāo)記的、抗GST標(biāo)簽蛋白的兔多克隆抗體,用于檢測細(xì)菌、酵母或昆蟲細(xì)胞表達(dá)的、帶GST的重組蛋白,用于表達(dá)純化過程中追蹤重組蛋白的完整性和回收率。多克隆抗體是用親和層析的方法制備,然后體外與HRP偶聯(lián)。帶本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 抗體帶有HRP,不再需要二抗。
2. 專一性強(qiáng),只識別N-端或C-端帶GST標(biāo)簽的重組蛋白。也可以識別天然的含連續(xù)六個GST序列的蛋白質(zhì)。
3. 可以用于Western Blot和免疫組化(一般需要稀釋50-2000倍使用)、ELISA(一般需要稀釋200-5000倍使用)。
4. 抗體與HRP共價偶聯(lián),非常穩(wěn)定。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質(zhì)分離,并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相,離心后可形成水相層和有機(jī)層,這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實驗步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會*分離,當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時,變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),通過離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
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