上海博湖生物科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: 高密度脂蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒,同型半胱氨酸ELISA檢測(cè)試劑盒,游離脂肪酸ELISA檢測(cè)試劑盒 |
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- www.shbhbio-e.com
參考價(jià) | ¥ 4988 | ¥ 3288 |
訂貨量 | 1 件 | 10 件 |
- 型號(hào)
- 品牌 其他品牌
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 所在地 上海市
更新時(shí)間:2023-10-28 20:58:47瀏覽次數(shù):571
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訂購(gòu)信息:
產(chǎn)品名稱:人ACTB基因核酸檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)
規(guī)格:50T
編號(hào):BH-P96714
分類:熒光PCR法
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份
使用及效果:
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
檢測(cè)步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
腎皮層上皮細(xì)胞Many types of cells(1ml)去氧膽酸Deoxycholic acid>95.0%
NRG1 Others Human NRG1-beta 1 (ECD) 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) β-環(huán)糊精β-Cyclodextrin>98.5%,藥用級(jí)
大鼠腎上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mLRamipril>98.0,BR
MR1 [derivative of HB-11048]中國(guó)倉(cāng)鼠X小鼠B細(xì)胞雜交瘤 MR1 [derivative of HB-11048] Chinese hamster X mouse B lymphocyte hybridoma RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS()RamiprilHPLC>98,
IGFBP6 Protein Human 重組 IGFBP6 / IBP-6 蛋白 (His 標(biāo)簽)>99%,BR
OLR1 Others Rat 大鼠 OLR1 / LOX1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) >99%,USP 32,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Spironolactone
神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)基NM-prf()HPLC>98%,Spironolactone
SiHa細(xì)胞,細(xì)胞 小鼠血細(xì)胞,WEHI-3細(xì)胞 成纖維細(xì)胞Many types of cells 5 × 105方(1ml)>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Azathioprine
Hela 299(細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸巴尼地平>99%,BRBarnidipine HCl
hMNC-CB pooled Pellet 類臍帶血單核細(xì)胞混合團(tuán)塊,超 > 1 mio.cells 角膜上皮細(xì)胞總RNAHCEpiC NA鹽酸頭孢吡1 含量82.5%~91.1%(每毫克頭孢吡1含量,干品)Cefepime
人ACTB基因核酸檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)NRK-52E 大鼠腎細(xì)胞單1酸鹽美國(guó)進(jìn)口Acyclovir Monophosphate
大額牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-2-d4美國(guó)進(jìn)口Acyclovir-d4
Caki-1, 腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞N2-乙酰基-9-(2-乙酰氧基乙氧基甲基)(雜質(zhì))美國(guó)進(jìn)口N2-Acetyl-9-(2-acetoxyethoxymethyl)guanine (Acyclovir Impurity)
腦瘤細(xì)胞;SF763 大鼠頜下腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL腺苷3′,5′-環(huán)單硫代1酸酯,8-氯-,Rp-異構(gòu)體鈉鹽美國(guó)進(jìn)口Adenosine 3′,5′-cyclic Monophosphorothioate, 8-Chloro-, Rp-Isomer, Salt
食管癌組織源性原代細(xì)胞Many types of cells 5 × 105方(1ml)/1ml阿西美辛()HPLC>98%,Acemetacin