上海博湖生物科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: 高密度脂蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒,同型半胱氨酸ELISA檢測(cè)試劑盒,游離脂肪酸ELISA檢測(cè)試劑盒 |
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- 郵編:
- 200000
- 個(gè)性化:
- www.shbhbio-e.com
參考價(jià) | ¥ 4988 | ¥ 3288 |
訂貨量 | 1盒 | 10盒 |
- 型號(hào) 50T
- 品牌 其他品牌
- 廠(chǎng)商性質(zhì) 經(jīng)銷(xiāo)商
- 所在地 上海市
更新時(shí)間:2023-11-08 07:41:31瀏覽次數(shù):529
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訂購(gòu)信息:
產(chǎn)品名稱(chēng):牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)核酸檢測(cè)試劑盒
規(guī)格:50T
編號(hào):BH-P96808
分類(lèi):熒光PCR法
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份
使用及效果:
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
檢測(cè)步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
MLTC-1(小鼠間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2*()Cetylpyridinium chloride含量測(cè)定
Promocell C-23110 Fibroblast Growth Medium KIT,成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基套裝 500ml*()Hydroxychloroquine sulfateUV法溶出度檢查
細(xì)胞車(chē)葉草苷()AsperulosideHPLC≥98%,
TSLP Others Mouse 小鼠 TSLP 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) Galeterone (TOK001)TOK-001>98%,CYP17抑制劑
G422瘤 神經(jīng)膠質(zhì)瘤山柰酚-3-槐二糖-7-鼠李糖苷Kaempferol 3-sophoroside-7-rhamnosideHPLC≥85%,
SMYD3 Others Human SMYD3 / ZMYND1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) */*()HPLC>98%,Valacyclovir HCl
表皮色素細(xì)胞-淺色素總RNAHEM-l NA*>99%,BRVecuronium Bromide
RT4細(xì)胞,膀胱癌細(xì)胞 胚肺細(xì)胞,MRC-5細(xì)胞 原代平滑肌細(xì)胞特制基礎(chǔ)無(wú)血清培養(yǎng)基Many types of cells 500/100ml*()>99%,Vecuronium Bromide
豹貓肺成纖維樣細(xì)胞;LCL4GDPNa2;5’-二1酸鳥(niǎo)苷二鈉>90%,BRGDP Di Salt
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) SU11274>98%,選擇性的Met抑制劑SU-11274
牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)核酸檢測(cè)試劑盒SGC-7901 胃癌細(xì)胞R-聯(lián)萘酚1酸酯>99%(R)-(-)-1,1'-Binaphthyl-2,2'-diyl hydrogenphosphate
CL-0410P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×22,6-二氯嘌呤>97%,*2,6-Dichloropurine
mCF, 小鼠心臟成纖維細(xì)胞2,4-二*唑啉>98%2,4-Dichloroquinazoline
胚腎上皮細(xì)胞系;KiMA 直腸粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL9-氯甲基蒽>98%,進(jìn)口原裝9-(Chloromethyl)anthracene
纖維肉瘤細(xì)胞;HT-10801-溴蒽(>97.0%(GC))>97.0%(GC)1-Bromoanthracene