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南京億迅生物科技有限公司
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| 參考價(jià) | ￥ 1070 | ￥ 800 |
| 訂貨量 | 1 件 | 5 件 |
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- 所在地 南京市
更新時(shí)間：2019-11-07 10:48:15瀏覽次數(shù)：471
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異檸檬酸裂解酶(ICL)檢測(cè)試劑盒
測(cè)定原理：
ICL催化異檸檬酸降解為乙醛酸和琥珀酸，乙醛酸和NADH在LDH的作用下生成乙醇和NAD，NADH在340nm下有特征吸收峰，監(jiān)測(cè)340nm吸光度的減小速率可間接反應(yīng)ICL活性。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計(jì)/、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水
試劑組成和配制：
提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存；
試劑一：液體15mL×1瓶，4℃保存；
試劑二：粉劑×1瓶，-20℃保存；
試劑三：液體×1支，4℃保存；
試劑四：粉劑×1瓶，4℃保存；臨用前每瓶加入4mL雙蒸水，充分混勻待用。用不完的試劑-20℃保存；
樣本的前處理：
1、細(xì)菌或細(xì)胞處理：收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照每500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（功率20％，超聲3秒，間隔10秒，重復(fù)30次），15000g，4℃，離心20分鐘，取上清，置冰上待測(cè)。
2、組織處理：稱取約0.1g組織，加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿；15000g ，4℃，離心20分鐘，取上清，置冰上待測(cè)。
測(cè)定步驟：
- 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm，蒸餾水調(diào)零。
- 樣本測(cè)定
（1）工作液的配置，將試劑二和試劑三轉(zhuǎn)移至試劑一中，充分混合溶解，置于37℃（哺乳動(dòng)物）或25℃（其它物種）水浴5min；
（2）在試劑四中加入4mL雙蒸水，充分溶解待用；
（3）在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL樣本、150μL工作液和40μL試劑四，混勻，立即記錄340nm處20s時(shí)的吸光值A1和 2min20s后的吸光值A2，計(jì)算ΔA=A1-A2。
異檸檬酸裂解酶(ICL)檢測(cè)試劑盒
