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南京億迅生物科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： 質(zhì)控樣品,人工血清,人工胃液,elisa試劑盒,化學(xué)試劑,生物試劑 |
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| 參考價(jià) | ￥ 2135 | ￥ 1600 |
| 訂貨量 | 1 件 | 5 件 |
- 型號(hào)
- 品牌
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
- 所在地 南京市
更新時(shí)間：2019-11-07 10:46:14瀏覽次數(shù)：561
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蔗糖磷酸化酶檢測(cè)試劑盒
測(cè)定原理
SP能夠以磷酸為受體，催化蔗糖產(chǎn)生1-磷酸葡萄糖，在葡萄糖磷酸變位酶催化下變位為6-磷酸葡萄糖，在6-磷酸葡萄糖脫氫酶作用下還原NADP+生成NADPH，導(dǎo)致340nm光吸收值增加。測(cè)定340nm吸光度增加速率，即可計(jì)算SP活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、低溫離心機(jī)、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計(jì)、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
試劑組成和配制
提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存。
緩沖液：液體40mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體25mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體2mL×1支，4℃保存。
試劑三：液體1mL×1支，4℃保存。
試劑四：粉劑1瓶，-20℃避光保存，臨用前加5mL雙蒸水溶解。
試劑五：粉劑1瓶，-20℃避光保存，臨用前加5mL雙蒸水溶解。
試劑六：粉劑1瓶，-20℃避光保存，臨用前加10mL雙蒸水溶解。
試劑七：粉劑1瓶，-20℃避光保存，臨用前加10mL雙蒸水溶解。
粗酶液提取
發(fā)酵液4℃，10000rpm，離心15min，取菌泥約0.5g，加入1mL提取液，用超聲波進(jìn)行破碎，功率為300w，破碎3s，間歇5s，總時(shí)間為3min，然后4℃，12000rpm，離心10min，取20μL測(cè)定蛋白含量，其余的作為待測(cè)樣本。
測(cè)定操作表
| 對(duì)照管 | 測(cè)定管 |
緩沖液（μL） | 850 | 650 |
試劑一（μL） | 500 | 500 |
試劑二（μL） | 30 | 30 |
試劑三（μL） | 20 | 20 |
試劑四（μL） | 100 | 100 |
試劑五（μL） | 100 | 100 |
試劑六（μL） | 200 | 200 |
試劑七（μL） | 200 | 200 |
混勻，37℃水浴預(yù)熱5min | ||
樣本（μL） |
| 200 |
迅速混勻，于1mL石英比色皿，對(duì)照管調(diào)零，測(cè)定340nm的初始值A1，測(cè)定完立即放入37℃水浴準(zhǔn)確反應(yīng)2min，迅速測(cè)定340nm吸光值A2，△A= A2- A1。 | ||
注意事項(xiàng)
- 粉劑-20℃保存，配制好的試劑建議盡快使用。
- 可選用BCA法測(cè)定蛋白含量試劑盒測(cè)定蛋白含量。
蔗糖磷酸化酶檢測(cè)試劑盒
