詳細(xì)介紹
卡式罐結(jié)構(gòu)
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卡式罐頂部密閉,頂蓋上裝有:3個(gè)緊箍、絕緣提環(huán)、可進(jìn)行通氧/排氣的氣孔,隔膜連接件用于檢查純種酵母培養(yǎng)。標(biāo)準(zhǔn)卡式罐提供完整的連接管和可進(jìn)行無(wú)菌通氧的單獨(dú)過(guò)濾器。卡式罐設(shè)計(jì)為可將其較容易地直接放入殺菌釜內(nèi) [1] 。
卡式罐優(yōu)點(diǎn)
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便于通氧;給酵母轉(zhuǎn)移提供了安全的條件;較易清洗;運(yùn)輸方便。
酵母擴(kuò)培的卡式罐工藝階段
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酵母擴(kuò)培的主要任務(wù)是在規(guī)定的時(shí)間內(nèi),培養(yǎng)足夠數(shù)量的強(qiáng)壯純種酵母,即在保證擴(kuò)培過(guò)程中培養(yǎng)酵母健壯生長(zhǎng)的同時(shí),不允許其它微生物生長(zhǎng)。在實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)培階段,70%的染菌是卡氏罐階段,因?yàn)樵撾A段不能象大生產(chǎn)一樣自動(dòng)控制,相對(duì)其它實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)培來(lái)講體積較大,控制較難。因此,如何減少卡氏罐階段的染菌機(jī)會(huì)就成了每個(gè)擴(kuò)培人員必須思考的問(wèn)題。。
以前的卡式罐工藝
1.三角瓶培養(yǎng)結(jié)束后將菌液從卡氏罐接種口倒人卡氏罐。為減少染菌機(jī)會(huì),特別制作火圈,在接種時(shí)通過(guò)燃燒的火圈從接種口將菌液倒入。此方法存在三個(gè)弊端:①接種過(guò)程中,火圈易將與火接觸的酵母種燒死,使酵母死亡率增加;②接種過(guò)程中,接種口是打開(kāi)的,因卡氏罐較高,不能用超菌臺(tái)的無(wú)菌風(fēng)保護(hù),加之火圈火力不可能很大,室內(nèi)的細(xì)菌很容易從接種口進(jìn)人卡氏罐,從而增加染菌機(jī)率。③接種過(guò)程中,菌液易粘于接種口邊緣,而增加染菌機(jī)會(huì)。
2.卡氏罐前一階段擴(kuò)培采用抽濾瓶(耐壓性必須好),培養(yǎng)過(guò)程中抽濾瓶口和側(cè)管用紗布包扎,卡氏罐接種時(shí)將抽濾瓶口部換成橡膠塞(膠塞中間帶有一支通至抽濾瓶底部的玻璃管,用生料帶與橡膠塞密封,事先包扎滅菌),從抽濾瓶側(cè)管通入壓縮空氣或氧氣將菌液通過(guò)玻璃管從卡氏罐取樣口處將酵母壓入卡氏罐。
3.方式2較方式l由于在接種過(guò)程中菌液不曝露于空氣中,故減少了染菌機(jī)會(huì),且可以減少接種過(guò)程引起的酵母死亡,但此方法仍有局限性:①此裝置對(duì)管路的密封性要求較高,如果稍有滲漏,即可能引起接種失敗。②實(shí)驗(yàn)室內(nèi)要有無(wú)菌氣源,如果氣源微生物不合格,反而會(huì)增加染菌機(jī)會(huì)。③卡氏罐接種前將所菌液管路滅好菌,在卡氏罐接種前將其換在抽濾瓶上,換的過(guò)程仍有一定的染菌機(jī)會(huì)。④需要兩人配合操作。
優(yōu)化后卡式罐工藝
將巴氏瓶側(cè)管處連接一條硅膠管,另一頭連接卡氏罐卡扣,卡氏罐空罐滅菌時(shí)即將硅膠管和卡扣連接好。卡氏罐接種時(shí),只需將巴氏瓶側(cè)管的卡扣與卡氏罐取樣口相連接,將巴氏瓶舉至高于卡氏罐取樣口,略?xún)A巴氏瓶至側(cè)管被種液浸沒(méi),用手捏橡膠管,種液即接人卡氏罐 [2] 。
改進(jìn)的卡氏罐接種方式的優(yōu)點(diǎn):①因接種過(guò)程無(wú)需氣源,故不會(huì)因氣源微生物不合格而引起染菌。②操作過(guò)程簡(jiǎn)單,只需1人即可完成接種操作。③整個(gè)接種過(guò)程沒(méi)有菌液直接與外界空氣的接觸機(jī)會(huì),從而大大減少了接種過(guò)程的染菌機(jī)會(huì)。④接種過(guò)程不會(huì)引起酵母死亡率的增加。⑤無(wú)方式2的管路不嚴(yán)的接種失敗危險(xiǎn)。實(shí)際操作證明,改進(jìn)后的接種方式簡(jiǎn)單、方便,能滿(mǎn)足酵母擴(kuò)培的需要。