兔子催乳素(PRL)ELISA試劑盒是一種常用于檢測(cè)兔子血清、血漿或其它生物樣品中催乳素含量的試劑盒。催乳素是前垂體分泌的一種多肽激素,主要調(diào)節(jié)哺乳動(dòng)物的乳腺發(fā)育和乳汁分泌,并參與調(diào)節(jié)生殖周期、代謝途徑等生理過程。
一、試劑盒原理
試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),即將標(biāo)準(zhǔn)品或樣品加入已涂有特異性抗體的微孔板孔中,使其與抗體結(jié)合,不結(jié)合的洗脫掉并加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的二抗,在其余的孔中與抗體結(jié)合,最后加入底物使其產(chǎn)生顏色反應(yīng),用光譜計(jì)測(cè)定反應(yīng)強(qiáng)度,據(jù)此計(jì)算出標(biāo)本中催乳素的含量。
二、試劑盒成分
兔子催乳素(PRL)ELISA試劑盒包括微孔板、催乳素標(biāo)準(zhǔn)品、抗體試劑、辣根過氧化物酶標(biāo)記的二抗試劑、顯色底物、停止溶液、洗滌緩沖液等多種試劑,其中標(biāo)準(zhǔn)品常用濃度為500ng/L,抗體及其它試劑按比例配制。
三、操作步驟
1、取出微孔板,標(biāo)注標(biāo)本順序。
2、加100μl標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣本到每個(gè)孔中。
3、加50μl抗體試劑到每個(gè)孔中,振蕩混合保溫1-2小時(shí)。
4、棄去孔內(nèi)液體,洗滌4-5次,使孔內(nèi)潔凈。
5、加100μl辣根過氧化物酶標(biāo)記二抗到每個(gè)孔中,振蕩混合保溫1小時(shí)。
6、棄去孔內(nèi)液體,洗滌4-5次,使孔內(nèi)潔凈。
7、加入100μL顯色底物到每一個(gè)孔中,避免接觸到陽光,在30min到60min內(nèi)孵育,制止反應(yīng)。
8、加入50μL停止溶液到每個(gè)孔中,用光譜計(jì)測(cè)定吸光值A(chǔ)450。
四、注意事項(xiàng)
1、試劑盒的使用前需要將試劑恢復(fù)至室溫,并均勻搖勻。
2、試劑盒應(yīng)在規(guī)定的有效期內(nèi)使用,過期試劑可能降低檢測(cè)的準(zhǔn)確性。
3、嚴(yán)格遵循試劑盒說明書中的步驟和比例配制,不同于說明書的操作可能會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。
4、使用前需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要決定樣品的預(yù)處理方式,如稀釋、提取等。
5、使用過程中應(yīng)嚴(yán)格按要求保護(hù)試劑盒免受光線和溫度等不利因素影響,以保證試劑的靈敏度和可靠性。
總之,兔子催乳素(PRL)ELISA試劑盒是一種簡便、高效的檢測(cè)兔子血清或其它生物樣品中催乳素含量的工具,廣泛應(yīng)用于生物學(xué)和動(dòng)物科學(xué)等領(lǐng)域。在使用時(shí),需要嚴(yán)格按照說明書上的操作流程進(jìn)行,以確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。