雞分泌型免疫球蛋白A(SIgA)ELISA試劑盒用于測定雞血清、血漿及相關(guān)液體樣本中雞分泌型免疫球蛋白A(sIgA)含量。應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中雞分泌型免疫球蛋白A(sIgA)水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被單抗的微孔中依次加入雞分泌型免疫球蛋白A(sIgA),再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。
顏色的深淺和樣品中的分泌型免疫球蛋白A(sIgA)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中分泌型免疫球蛋白A(sIgA)濃度。
1、雞分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2、濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3、各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4、請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔di一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請乘以稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6、底物請避光保存。
7、嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
8、所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9、雞分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA試劑盒不同批號組分不得混用。