基于對(duì)抗體生產(chǎn)的需求和研究人自身免疫性肝病的重要性,本論文從Human Fetal Liver Creator SMART cDNA Library中擴(kuò)增了7個(gè)人自身免疫性肝病相關(guān)抗原的基因,插入帶His.tag標(biāo)簽的酵母表面展示載體pICAS-H中,獲得7個(gè)重組質(zhì)粒,在Genbank的人源基因組數(shù)據(jù)庫中通過BLAST比對(duì)重組質(zhì)粒的測(cè)序結(jié)果,發(fā)現(xiàn)克隆基因與同源性序列的大相似度均在99％以上；
抗大鼠免疫球蛋白G2c單抗說明書
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名 稱：抗大鼠免疫球蛋白G2c單抗。
克 隆 號(hào)：YIG264。
目 錄 號(hào)：YP827565
亞 型：IgG
緩 沖 液：0.01mol/L的PBS、pH：7.2、0.2%Procline-300。
免 疫 原：大鼠免疫球蛋白G2c
制備方法：取健康BALB/C小鼠單抗腹水。
純化方法：親和純化。
應(yīng)用范圍：抗體針對(duì)的是大鼠免疫球蛋白G2c表位，適用于ELISA、CLIA、 WB、IHC等免疫實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品純度：不低于總蛋白的95%。
儲(chǔ)存方法：存放在-20℃。
注意事項(xiàng)：避免反復(fù)凍融。
有效期限：請(qǐng)您在管體注明有效期內(nèi)使用。
使用建議：本產(chǎn)品可以用于大鼠免疫球蛋白G2c的免疫學(xué)反應(yīng)相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
酵母表面展示體系能夠展示糖基化和二硫鍵異構(gòu)化等修飾的真核蛋白,蛋白在酵母細(xì)胞表層可直接利用流式細(xì)胞儀檢測(cè),進(jìn)行活性分選,通過一步離心即可分離獲得表達(dá)的蛋白,易實(shí)現(xiàn)高通量篩選。酵母表面展示體系已經(jīng)成功的應(yīng)用于篩選抗體、抗體酶和其他生物因子,但穩(wěn)定的蛋白表面展示還受到多種因素的影響。目前,自身免疫性疾病(AID)的診斷和治療均需要高效價(jià)的自身抗體和抗體藥物,而檢測(cè)和分析AID的自身抗體有助于免疫病理機(jī)制研究。而現(xiàn)有的抗體檢測(cè)和抗體制備方法均離不開高純度的抗原,有限的獲得方法和復(fù)雜的操作過程影響了抗體的生產(chǎn)和應(yīng)用。 基于對(duì)抗體生產(chǎn)的需求和研究人自身免疫性肝病的重要性,本論文從Human Fetal Liver Creator SMART cDNA Library中擴(kuò)增了7個(gè)人自身免疫性肝病相關(guān)抗原的基因,插入帶His.tag標(biāo)簽的酵母表面展示載體pICAS-H中,獲得7個(gè)重組質(zhì)粒,在Genbank的人源基因組數(shù)據(jù)庫中通過BLAST比對(duì)重組質(zhì)粒的測(cè)序結(jié)果,發(fā)現(xiàn)克隆基因與同源性序列的大相似度均在99％以上；再將重組表面展示載體整合到釀酒酵母宿主MT8-1的基因組上,構(gòu)建了表面展示人自身免疫性肝病抗原的7株重組酵母菌。 分別誘導(dǎo)培養(yǎng)7株重組酵母菌,用免疫熒光染色,通過流式細(xì)胞儀和熒光顯微鏡檢測(cè),證明克隆的7個(gè)抗原蛋白均成功展示于酵母表面；展示抗原GST Al和ProI的重組酵母
酵母表面展示體系能夠展示糖基化和二硫鍵異構(gòu)化等修飾的真核蛋白,蛋白在酵母細(xì)胞表層可直接利用流式細(xì)胞儀檢測(cè),進(jìn)行活性分選,通過一步離心即可分離獲得表達(dá)的蛋白,易實(shí)現(xiàn)高通量篩選。酵母表面展示體系已經(jīng)成功的應(yīng)用于篩選抗體、抗體酶和其他生物因子,但穩(wěn)定的蛋白表面展示還受到多種因素的影響。目前,自身免疫性疾病(AID)的診斷和治療均需要高效價(jià)的自身抗體和抗體藥物,而檢測(cè)和分析AID的自身抗體有助于免疫病理機(jī)制研究。而現(xiàn)有的抗體檢測(cè)和抗體制備方法均離不開高純度的抗原,有限的獲得方法和復(fù)雜的操作過程影響了抗體的生產(chǎn)和應(yīng)用。 基于對(duì)抗體生產(chǎn)的需求和研究人自身免疫性肝病的重要性,本論文從Human Fetal Liver Creator SMART cDNA Library中擴(kuò)增了7個(gè)人自身免疫性肝病相關(guān)抗原的基因,插入帶His.tag標(biāo)簽的酵母表面展示載體pICAS-H中,獲得7個(gè)重組質(zhì)粒,在Genbank的人源基因組數(shù)據(jù)庫中通過BLAST比對(duì)重組質(zhì)粒的測(cè)序結(jié)果,發(fā)現(xiàn)克隆基因與同源性序列的相似度均在99％以上；再將重組表面展示載體整合到釀酒酵母宿主MT8-1的基因組上,構(gòu)建了表面展示人自身免疫性肝病抗原的7株重組酵母菌。 分別誘導(dǎo)培養(yǎng)7株重組酵母菌,用免疫熒光染色,通過流式細(xì)胞儀和熒光顯微鏡檢測(cè),證明克隆的7個(gè)抗原蛋白均成功展示于酵母表面；展示抗原GST Al和ProI的重組酵母
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