伊萊博生物科技(上海)有限公司
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更新時(shí)間:2024-09-27 08:59:08瀏覽次數(shù):1907
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Mallory染色
實(shí)驗(yàn)材料
Mallory試劑盒、95%乙醇、無水乙醇、二甲苯、中性樹脂
Mallory染色過程:
1. 組織準(zhǔn)備
?固定?:將組織樣本固定于10%福爾馬林固定液中,以保存其形態(tài)和化學(xué)成分。
?脫水包埋?:將固定后的組織進(jìn)行常規(guī)脫水處理,然后用石蠟包埋,以便切片。
2. 切片與脫蠟
?切片?:使用切片機(jī)將包埋好的組織切成4μm厚的石蠟切片。
?脫蠟?:將切片置于一系列不同濃度的乙醇中,使石蠟逐漸溶解并脫去,最終將切片水化至水相。
3. 氧化與漂白
?氧化?:將切片浸入酸化gaomengsuanjia溶液中氧化一定時(shí)間(通常為5分鐘),以增強(qiáng)組織的染色效果。
?水洗?:用蒸餾水或自來水輕輕沖洗切片,去除殘留的gaomengsuanjia溶液。
?漂白?:將切片浸入草酸溶液中漂白1~2分鐘,以去除多余的氧化產(chǎn)物,并準(zhǔn)備進(jìn)行染色。
4. 染色
?PTAH染色?:將切片浸入Mallory PTAH染色液(自然氧化法)中,加蓋浸染24~48小時(shí)。此步驟是染色的核心,磷鎢酸蘇木素將與組織中的蛋白質(zhì)成分結(jié)合,形成鮮明的染色效果。
5. 分色與脫水
?分色?:用95%的乙醇迅速洗去切片上多余的染液,此步驟需迅速進(jìn)行,以避免顏色過度脫失。
?脫水?:將切片依次置于更高濃度的乙醇中進(jìn)行脫水處理,直至無水乙醇。
6. 透明與封固
?透明?:使用二甲苯等透明劑對(duì)切片進(jìn)行透明處理,以去除切片中的乙醇并增加其透明度。
?封固?:最后,用中性樹膠將切片封固在載玻片上,以便長(zhǎng)期保存和觀察。
染色結(jié)果:
Mallory染色是一種在生物化學(xué)和病理學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的染色方法,特別用于結(jié)締組織的染色。它主要用于顯示膠原纖維和其他蛋白質(zhì)成分,使得在顯微鏡下觀察時(shí),這些結(jié)構(gòu)能夠更清晰地呈現(xiàn)出來。
Mallory染色通常使用酸性品紅或天青B等酸性染料,并結(jié)合磷鎢酸或磷鉬酸等媒染劑。這些酸性染料能夠與組織中的蛋白質(zhì)成分結(jié)合,而媒染劑則能增強(qiáng)染料的染色效果,使得染色更加鮮明和持久。
通過Mallory染色,病理學(xué)家可以更容易地觀察和分析結(jié)締組織中的膠原纖維和其他蛋白質(zhì)成分,從而幫助診斷與這些結(jié)構(gòu)相關(guān)的疾病。例如,在肝臟疾病的診斷中,Mallory染色可以幫助識(shí)別肝硬化時(shí)肝小葉結(jié)構(gòu)的變化和膠原纖維的增生情況。
需要注意的是,Mallory染色是一種比較復(fù)雜的染色方法,需要經(jīng)驗(yàn)豐富的技術(shù)人員進(jìn)行操作。同時(shí),染色結(jié)果也可能受到多種因素的影響,如染液的濃度、染色時(shí)間、洗滌條件等。因此,在進(jìn)行Mallory染色時(shí),需要嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件,以確保染色結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。